معلومة

لماذا لا يتم استخدام ACE2 كدواء ضد كوفيد؟

لماذا لا يتم استخدام ACE2 كدواء ضد كوفيد؟


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

هل يمكن إنتاج الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 واستخدامه كدواء ضد فيروس كورونا؟ قرأته هو جزيء المستقبل. إذا كان في الكائن الحي فينبغي أن يرتبط الفيروس به ولا يمكنه مهاجمة الخلايا بعد الآن؟ هل هذا صحيح؟


هناك زنزانة طباعة مسبقة بواسطة Monteil et al. (DOI: 10.1016 / j.cell.2020.04.004) الذي يجادل بأن بروتين ACE2 القابل للذوبان البشري المؤتلف يمكن أن يرتبط بشكل تنافسي بفيروس SARS-CoV-2 ويقلل من قدرته على العدوى والتكاثر:

هنا ، أبلغنا أن ACE2 القابل للذوبان البشري القابل للذوبان من الدرجة السريرية (hrsACE2) ، والذي تم اختباره بالفعل في المرحلة الأولى والمرحلة 2 من التجارب السريرية (Haschke et al. ، 2013 ، Khan et al. ، 2017) ، يمكن أن يقلل من النمو الفيروسي في خلايا Vero E6 بعامل 1000-5000. علاوة على ذلك ، نظهر أن عضيات الأوعية الدموية وعضويات الكلى يمكن أن تصاب بسهولة ، والتي يمكن تثبيطها بشكل كبير بواسطة hrsACE2 في المرحلة المبكرة من العدوى.

على الرغم من أنها ليست مثالية ، إلا أن العوامل والمستقبلات الأخرى قد تكون متورطة في العدوى:

تُظهر بياناتنا الآن أن جزيء ACE2 البشري من الدرجة السريرية - ولكن ليس ACE2 القابل للذوبان في الماوس - يمكن أن يثبط بشكل كبير عدوى SARS-CoV-2 ويقلل الحمل الفيروسي بعامل من 1،000 إلى 5،000. ومع ذلك ، كما لوحظ في تجارب تحييد الأجسام المضادة للعديد من الفيروسات ، فإن التثبيط ليس كاملاً ، على الرغم من أنه يعتمد بشكل واضح على الجرعة. قد يكون هذا بسبب حقيقة أنه قد يكون هناك مستقبلات مشتركة / بروتينات مساعدة أخرى أو حتى آليات أخرى يمكن للفيروسات أن تدخل الخلايا من خلالها ، كما تم اقتراحه في البداية لمرض السارس (Jeffers et al. ، 2004 ؛ Qi et al. ، 2020 ).

شخص واحد محق في التعليق على ذلك في المختبر دراسات. بعبارة أخرى ، يعاملون مزارع الخلايا على المكافئ الوظيفي لطبق بتري: خطوط خلايا فيرو أو محاكاة الأنسجة البشرية (العضيات) ، ويرون ما يحدث.

ال في المختبر الدراسات مفيدة ومهمة ولكنها خطوة كبيرة من تلك إلى 1) معالجة الناس في الجسم الحي - تصميم دواء يمكن أن يستهدف الفيروس فعليًا وبأمان حيث يصيب أنسجة الجهاز التنفسي والكلى - و ، 2) صنع هذا الدواء وتوزيعه بكميات وبأسعار رخيصة وبأمان ، وما إلى ذلك.

لكن النقطة الأكبر في هذه الدراسات هي إظهار أن العلماء يفكرون بالتأكيد في الآليات التي يصيب الفيروس الخلايا من خلالها ، ومعرفة ما إذا كانت هناك طرق للتدخل في الفيروس والحد منه ، من خلال القيام بذلك.

مثل تفكيرك في استخدام ACE2 ، نظر بعض الباحثين في فيروسات أخرى ، مثل فيروس شلل الأطفال وفيروس نقص المناعة البشرية ، لمعرفة ما إذا كانت هناك روابط قابلة للذوبان مماثلة يمكنها الارتباط بالأجسام المضادة وتوصيلها بأمان إلى البشر ، كفكرة علاجية عامة.

ووجدوا أن فيروس HIV-1 ، الذي يستخدم الارتباط بمستقبل CD4 كوسيلة لإصابة الخلايا التائية ، يمكن أن يطور مقاومة طفرية للـ CD4 القابل للذوبان ويستخدم آليات أخرى لإحداث العدوى. ولكن من خلال إضافة مستقبل ثاني CCR5 إلى الغلوبولين المناعي ، تمكن باحثون آخرون من الحد من قدرة فيروس HIV-1 على تطوير مقاومة لكلا المستقبلين ، مما يوفر بعض الاحتمالات لهذا النهج كلقاح في المستقبل.

كل هذه القضايا تعقد استخدام المستقبلات كوسيلة "لتزييف" الفيروس. لكنها وسيلة يتم استكشافها ، خاصة بالنسبة لهذا الفيروس في أوقات الطوارئ.


العلماء يبحثون عن إجابات لارتفاع ضغط الدم - وصلة COVID-19

بوسطن ـ في عالم رالف باريك الحاصل على درجة الدكتوراه ، ليس هناك الكثير من المصادفة.

لذا فقد استشاط عندما رأى أن SARS-CoV-2 ، الفيروس المسبب لمرض COVID-19 ، يدخل الرئتين من خلال مستقبلات ACE2 ، وأن الأشخاص المصابين بارتفاع ضغط الدم لديهم نتائج أسوأ من أولئك الذين يعانون من أي حالة كامنة أخرى.

قال باريك ، أستاذ علم الأوبئة وعلم الأحياء الدقيقة وعلم المناعة في كلية جيلينجز للصحة العامة العالمية في تشابل هيل بولاية نورث كارولينا ، والذي سبق أن قام دراسة تفشي فيروس كورونا لعقود.

باريك ليس وحده. بينما تتدافع المعاهد الوطنية للصحة والشركات الخاصة لاختبار العلاجات الحالية والمبتكرة لـ COVID-19 ، يحاول الباحثون والأطباء تحديد ما إذا كان الارتفاع الحاد في مرض COVID-19 الخطير لدى المصابين بارتفاع ضغط الدم الأساسي هو مصادفة للعمر والمرض العام الصحة ، أو إذا كان يتحدث عن الدور الذي تلعبه مستقبلات ACE2 في كل من ارتفاع ضغط الدم وعدوى COVID-19. وإذا كان هناك ارتباط ، فهم يريدون معرفة ما إذا كانت مثبطات الإنزيم المحول للأنجيوتنسين تساعد أو تؤذي الأشخاص الأكثر عرضة للإصابة بمرض COVID-19 الحاد.

قال كريس لونجينكر ، العضو المنتدب بكلية الطب بجامعة كيس ويسترن ريزيرف في كليفلاند ، الذي شاهد عرض باريك في المؤتمر الافتراضي حول الفيروسات القهقرية والعدوى الانتهازية (CROI): "من المهم حقًا أن نقول إن هذه كلها تأملات نظرية" في الوقت الحالي. ، وهو متصل الآن.

قال لونجينكر: "لا يوجد دليل على علمي بفوائدها السريرية في الوقت الحالي" Medscape Medical News.

خلال الجلسة نفسها ، قدم Zunyou Wu ، دكتوراه في الطب ، دكتوراه ، كبير علماء الأوبئة في المركز الصيني لمكافحة الأمراض والوقاية منها ، بيانات تظهر أن أكثر من 40 ٪ من الأشخاص المصابين بعدوى شديدة يعانون من ارتفاع ضغط الدم الأساسي. من بين المصابين بمرض شديد ، كان المرض التالي الأكثر شيوعًا هو مرض السكري ، بمعدل نصف هذا المعدل تقريبًا. تم وصف بيانات مماثلة في مكان آخر ، كما ذكرت من قبل Medscape Medical News.

SARS-CoV-2 و ACE2

اتضح أن SARS-CoV-2 كان مصممًا تقريبًا لجسم الإنسان. على الرغم من أنه يبدو أنه ظهر من الخفافيش أو الأنواع التي تتغذى عليها الخفافيش ، فإن التفكير الحالي هو أن هناك عددًا من هذه الفيروسات "الشبيهة بالسارس" الموجودة بالفعل في مجتمعات الخفافيش التي تستخدم مستقبلات ACE2 لغزو الخلايا. توجد المستقبلات في أنواع متعددة ، وفي البشر تنتشر في القلوب والرئتين.

بالإضافة إلى ذلك ، يلعبون دورًا في الإصابة بارتفاع ضغط الدم والسكري ، ويتواجدون بأعداد أكبر في الأشخاص المصابين بأمراض القلب والأوعية الدموية.

عادة ، حتى إذا كان الفيروس موجودًا في الخفافيش ، فإنه يأخذ عدة جولات من الطفرات قبل أن ينتقل من الأنواع الأصلية المضيفة إلى نوع آخر ثم إلى البشر. وقد يستغرق الأمر أيضًا بعض الوقت حتى ينتقل الفيروس من عدوى حميدة نسبيًا إلى شيء يصبح وباءً.

لكن باريك والباحثين الآخرين الذين قاموا بتسلسل فيروسات فيروسات الخفافيش الحالية يعتقدون الآن أن مجموعات الخفافيش "مزروعة بفيروسات مبرمجة مسبقًا تم تصميمها لاستخدام مستقبلات ACE2 متعددة الخفافيش. بالصدفة العشوائية ، يمكن لبعض هؤلاء استخدام البشر بشكل مباشر أو خزان ثانوي" مضيف "، قال.

بمعنى آخر ، يمكن للفيروسات القفز على الخط والانتقال مباشرة من فيروس الخفافيش فقط إلى فيروس بشري. وأوضح باريك أنه "في بعض الحالات ، قد تكون هذه الفيروسات قادرة على البرمجة مباشرة إلى النطاق الوبائي".

قال باريك إن حقيقة أن فيروس SARS-CoV-2 يستهدف مستقبلات ACE2 قد تكون مهمة. على سبيل المثال ، يوجد ACE2 على كروموسوم مرتبط بالجنس ، مما يعني أن النساء يعبرن عن المستقبل بمستويات أعلى من الرجال. ولكن وفقًا لبيانات وو ، فإن نتائج فيروس كورونا لدى الرجال أسوأ من النساء.

ثم هناك مشكلة مثبطات الإنزيم المحول للأنجيوتنسين. مثبطات نظام رينين - أنجيوتنسين - الألدوستيرون ، والتي تتضمن مثبطات الإنزيم المحول للأنجيوتنسين ، تسبب زيادة في التعبير عن مستقبلات ACE2 ، وفقًا لتعليق حديث في مراجعات الطبيعة لأمراض القلب.

كتب الباحثون الصينيون: "يجب دراسة السلامة والتأثيرات المحتملة للعلاج الخافض لضغط الدم باستخدام مثبطات الإنزيم المحول للأنجيوتنسين أو حاصرات مستقبلات الأنجيوتنسين في مرضى COVID-19". "ما إذا كان المرضى المصابون بـ COVID-19 وارتفاع ضغط الدم الذين يتناولون مثبطات الإنزيم المحول للأنجيوتنسين أو حاصرات مستقبلات الأنجيوتنسين يجب أن يتحولوا إلى دواء آخر خافض للضغط يظل أمرًا مثيرًا للجدل ، وهناك حاجة إلى مزيد من الأدلة."

تمت مناقشة هذا التعبير المتزايد عن مستقبلات ACE2 في الآونة الأخيرة BMJ رسالة ، أشار فيها باحثون سويسريون إلى أننا "نحتاج إلى دراسات وبائية وما قبل سريرية سريعة لتوضيح هذه العلاقة".

وكتبوا أنه إذا كان هناك ارتباط بين مثبطات الإنزيم المحول للأنجيوتنسين والفيروس ، "فقد نتمكن من تقليل مخاطر دورات COVID-19 المميتة في العديد من المرضى عن طريق استبدال هذه الأدوية مؤقتًا".

ومع ذلك ، فقد ثبت أن ACE2 يلعب دورًا وقائيًا في متلازمة الضائقة التنفسية الحادة التي تسببها الأنفلونزا ، ومع تقدم العمر ، ينخفض ​​تعبير ACE2 ، كما قال باريك ، الذي يوافق على أن هناك حاجة إلى مزيد من البحث.

وقال "من المحتمل أن تكون هناك علاقة مباشرة بمستوى التعبير ACE2 وشدة المرض". "وربما يلعب دورًا ما في اتجاهات الشدة المرتبطة بالعمر" التي رأيناها في COVID-19.

تم تقييم الأدوية الجزيئية الصغيرة المصممة لربط الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 ومنع الإصابة بالسارس في دراسة أجريت عام 2013. قال باريك: "إنها فكرة جيدة جدًا أن تعود وتكتشف استخدام هذه الأدوية ، سواء في المختبر أو في النماذج الحيوانية المحسّنة".

الأسئلة التي لم يرد عليها

بالنسبة لجمهور CROI ، أثارت قضية ارتفاع ضغط الدم و COVID-19 أسئلة أكثر من الإجابات.

بعد الجلسة ، سألت كيري ألتوف ، دكتوراه ، من كلية جونز هوبكنز بلومبيرج للصحة العامة في بالتيمور ، عبر تغريدة ، عدد المدخنين في السكان الذين أبلغت وو عنهم ، وعدد المرضى الذين يتناولون الأدوية الخافضة للضغط ، ولكن لم يحدث ذلك بعد. سمعت رد من وو ، قالت Medscape Medical News.

قال لونجينكر إنه يميل إلى التراجع عن ديناميكيات مستقبلات الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 ومثبطات الإنزيم المحول للأنجيوتنسين ، ويتساءل عما إذا كانت العلاقة بين ارتفاع ضغط الدم ونتائج COVID-19 الأسوأ قد تكون مبالغة في تمثيل كبار السن.

وقال "كبار السن لديهم معدلات أعلى من ارتفاع ضغط الدم ومعدلات أعلى من أمراض القلب والأوعية الدموية" Medscape Medical News. "قد يكون هذا تفسيرا. قد لا علاقة له بمستقبلات الأنجيوتنسين. في كلتا الحالتين ، هذه أشياء تستحق الاستكشاف."

وبائيات COVID-19 الآن وفي المستقبل

حتى الآن ، انتشر SARS-CoV-2 أبعد وأسرع من السارس ، وله خصائص سريرية مختلفة. على سبيل المثال ، أظهر وو أنه على عكس اندلاع السارس الأصلي في أوائل العقد الأول من القرن الحالي ، عندما بدأ التخلص من الفيروس بعد أيام من ظهور الأعراض ، يمكن أن يبدأ التخلص الفيروسي من SARS-CoV-2 قبل ظهور الأعراض بـ 24 إلى 48 ساعة.

وأوضح وو "بالنسبة لمرضى السارس ، فإن ارتداء القناع جيد بما يكفي لوقف انتقال العدوى". "بالنسبة لـ COVID-19 ، يحتاج كل من المرضى والأشخاص الأصحاء إلى ارتداء أقنعة لوقف انتقال العدوى".

قال جون بروكس ، دكتوراه في الطب ، من المركز الوطني لفيروس نقص المناعة البشرية / الإيدز ، والتهاب الكبد الفيروسي ، والأمراض المنقولة بالاتصال الجنسي ، والوقاية من السل في مراكز السيطرة على الأمراض والوقاية منها (CDC) ، أثناء عرضه ، إن الفيروس أيضًا أقل فتكًا من السارس.

ومع ذلك ، بالنظر إلى البيانات الحالية واعتمادًا على مدى نجاح الولايات المتحدة في اختبار وعلاج الأشخاص المصابين بالفيروس ، فإن معدل الوفيات المحتمل من COVID-19 سيكون بين 0.5٪ و 3.5٪ ، وفقًا لمركز السيطرة على الأمراض.

وقال بروكس: "يمكن أن يكون COVID-19 أكثر فتكًا بـ5 إلى 35 مرة من الإنفلونزا الموسمية". يوم الأربعاء ، قال أنتوني فوسي ، العضو المنتدب ، مدير المعهد الوطني للحساسية والأمراض المعدية ، أمام جلسة استماع في الكونجرس إنه يتوقع أن يكون كوفيد -19 مميتًا بعشر مرات مثل الإنفلونزا.

مؤتمر حول الفيروسات القهقرية والعدوى الانتهازية (CROI) 2020. تم تقديمه في 10 مارس 2020.


مراجعة المادة

  • 1 مشروع الحماية العصبية ، مركز الهندسة الوراثية والتكنولوجيا الحيوية ، قسم الأدوية ، هافانا ، كوبا
  • 2 مشروع حماية الخلايا ، مركز الهندسة الوراثية والتكنولوجيا الحيوية ، قسم الأدوية ، هافانا ، كوبا
  • 3 وحدة العناية المركزة 8 ب ، مستشفى هيرمانوس أميجيراس ، هافانا ، كوبا
  • 4 إدارة البحوث الطبية الحيوية ، مركز الهندسة الوراثية والتكنولوجيا الحيوية ، هافانا ، كوبا

أصبح توزيع فيروس SARS-CoV-2 الوبائي جنبًا إلى جنب مع ميزته الخاصة المتمثلة في تعطيل الاستجابة الذاتية القائمة على مضاد للفيروسات ، وبالتالي إضعاف المناعة الفطرية ، تحديًا للمجتمع العلمي والطب الدولي. لحسن الحظ ، فإن الإنترفيرون المؤتلف كمنتجات علاجية قد تراكمت لديه تاريخ طويل من النتائج العلاجية المفيدة في علاج الأمراض الفيروسية المزمنة والحادة وكذلك في علاج بعض أنواع السرطان. كان أحد العلاجات الأولى المضادة للفيروسات أثناء ظهور COVID-19 في الصين يعتمد على استخدام interferon alfa 2b المؤتلف ، لذلك بدأ العديد من الأطباء في استخدامه ، ليس فقط كعلاج ولكن أيضًا كنهج وقائي ، بشكل رئيسي في الطاقم الطبي. في الوقت نفسه ، قدمت الأبحاث الأساسية حول الإنترفيرون رؤى جديدة ساهمت في فهم أفضل بكثير لكيفية استخدام العلاج بالإنترفيرون ، الذي اعتُبر في البداية كأدوية مضادة للفيروسات ، في الواقع على نطاق دوائي أوسع بكثير. في هذه المراجعة ، نصف بإيجاز الإنترفيرون ، وكيف يتم تحريضها في حالة الإصابة بعدوى فيروسية ، وكيف أنها تثير الإشارات بعد ملامستها لمستقبلاتها المحددة على الخلايا المستهدفة. بالإضافة إلى ذلك ، يتم وصف بعض الجينات التي يتم تحفيزها بواسطة النوع الأول من الإنترفيرونات ، وكذلك الطريقة التي يتم بها نسف الإشارات بوساطة الإنترفيرون بواسطة الفيروسات التاجية وخاصةً عن طريق SARS-CoV-2. يعد جين الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 (ACE2) أحد جينات استجابة الإنترفيرون. على الرغم من أن هذه الحقيقة بالنسبة للعديد من العلماء يمكن أن تؤدي إلى تأثير سلبي لعلاج مضاد للفيروسات في مرضى COVID-19 ، فإن تعبير ACE2 يساهم في توازن نظام الرينين أنجيوتنسين ، والذي يتأثر بشكل كبير بـ SARS-CoV-2 في استيعابها في الخلية . تتضمن هذه المخطوطة أيضًا العلاقة بين النوع الأول من الإنترفيرون والعدلات ، و NETosis ، والإنترلوكين 17. أخيرًا ، تحت العنوان الفرعي & # x201ctake-home messages & # x201d ، نناقش الأساس المنطقي وراء العلاج في الوقت المناسب مع الإنترفيرون في سياق COVID- تم التأكيد على 19.


وظيفة ACE2 وتوزيع المستقبلات واستتباب RAS

يعمل RAS كمسار للإشارات كمنظم استتباب لوظيفة الأوعية الدموية ، وعلى مستوى الأنسجة فإنه ينظم الوظيفة داخل الأعضاء مثل الكلى والرئتين والقلب .17 على المستوى الإقليمي ، ينظم RAS تدفق الدم إلى الأعضاء ويتحكم في الاستجابات الغذائية مجموعة واسعة من المحفزات بما في ذلك موت الخلايا ، والإصابة ، والالتهاب ، والتليف وإصلاح الأوعية الدموية.

يستقلب ثنائي الببتيد كاربوكسي ببتيداز ACE الأنجيوتنسين 1 لتشكيل الأنجيوتنسين 2 (Angi) ويتم استقلاب Angi لاحقًا بواسطة carboxypeptidase ACE2 في موسع الأوعية أنجيوتنسين (1-7) (Angiotensin 1) .19 في حين أن ACE و AngII كانا محور العلاج الاستهداف لأكثر من أربعة عقود ، ظهر 20 ACE2 مؤخرًا فقط كلاعب رئيسي في اختلال توازن RAS ، خاصة في وجود المرض. على الرغم من أن ACE2 يشترك في التماثل المتسلسل مع المجال خارج الخلية لـ ACE ، إلا أنه يعمل بشكل مختلف تمامًا مثل carboxypeptidase ولا يتم حظره بواسطة مثبطات ACE. لذلك ، يمثل ACE2 مسارًا داخليًا مضادًا للتنظيم مع RAS ويعمل في مقابل محور ACE (الشكل 3). في الواقع ، في نظام القلب والأوعية الدموية ، قد يكون ACE2 أكثر أهمية من ACE في تنظيم التأثيرات المحلية لـ AngII و Ang1-7 مع عواقب موازنة تنشيط RAS. 21 22 AngII يساهم في ارتفاع ضغط الدم الجهازي ويعزز محليًا تضيق الأوعية والخلل البطاني والتهاب الأوعية الدموية ، الإجهاد التأكسدي البطاني ، انتقال خلايا العضلات الملساء ، الانتشار والتقلص والتخثر الموضعي .23 24 في سياق متلازمة الضائقة التنفسية الحادة (ARDS) ، يعتبر AngII لاعبًا محوريًا في نفاذية الأوعية الدموية وتضخيم السيتوكين وتسلل الخلايا الالتهابية. 21 23 24 في المقابل ، Ang1-7 يعارض تأثيرات الأوعية الدموية المحلية لـ AngII ، وله تأثيرات مضادة للأكسدة ومضادة للالتهابات ويخفف من أمراض الأوعية الدموية في نماذج الفئران.

توازن RAS-ACE2 في ظل ظروف صحية طبيعية 10 19 اضطراب توازن RAS-ACE2 في أمراض القلب والأوعية الدموية وارتفاع ضغط الدم ومرض السكري 22 قد يؤدي COVID-19 إلى زيادة تنظيم RAS في مرضى CVD واستنفاد اقتراح ACE233 بأن العلاج البديل rhACE2 يحسن توازن RAS-ACE2 عن طريق زيادة الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 وتقليل تنشيط RAS.

تظهر دراسات الضربة القاضية الجينية أنه في ظل الظروف العادية يكون لنقص الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 تأثيرات متواضعة نسبيًا على ضغط الدم واستتباب القلب والأوعية الدموية ووظائف الكلى عند مقارنتها بحذف جين الإنزيم المحول للأنجيوتنسين (26). ، احتشاء عضلة القلب أو قصور القلب ، يؤدي نقص الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 إلى تضخيم النمط الظاهري المرضي المرتبط بـ RAS في النماذج الحيوانية والعينات السريرية. أكبر تضخم القلب الناجم عن AngII والتليف والاحتشاء ، 30 في حين أن حذف ACE يمنح انخفاضًا طفيفًا في دوران AngII ، ولكن لا يؤثر على مستويات الأنسجة. تدهور AngII ، والذي يسلط الضوء على الأهمية المحتملة لـ ACE2 اضطراب على مستوى الأنسجة خاصة في حالات تنشيط RAS. علاوة على ذلك ، يؤكد هذا على إمكانية استبدال ACE2 كاستراتيجية أكثر فاعلية في تقليل AngII وزيادة Ang1-7 مقارنةً بتثبيط RAS التقليدي.

وبالتالي ، في أمراض القلب والأوعية الدموية ، يوجد عدم توازن بين زيادة تنشيط RAS وتقليل التأثيرات التنظيمية المضادة لـ ACE2 (الشكل 3) ، مما قد يجعل الأشخاص الذين يعانون من زيادة عبء مخاطر القلب والأوعية الدموية عرضة للظروف التي تؤدي إلى تفاقم عدم التناسق في RAS / ACE2.


استبدال أنجيوتنسين- (1-7) لمنع تلف الرئة في عدوى السارس- CoV-2؟

قسم الصيدلة ، كلية الطب ، جامعة مدريد المستقلة ، إسبانيا (CP).

Instituto de Investigaciones Sanitarias IdiPAZ ، مدريد ، إسبانيا (CP).

Salvador Moncada، FRS، FMedSci، HonFBPhS، Manchester Cancer Research Center، The University of Manchester، 555 Wilmslow Rd، Manchester M20 4GJ، United Kingdom Email

مركز أبحاث السرطان في مانشستر ، جامعة مانشستر ، المملكة المتحدة (SM).

مثل فيروس كورونا المتلازمة التنفسية الحادة الوخيمة (SARS-CoV) ، يدخل الفيروس التاجي الجديد SARS-CoV-2 ، الذي يسبب مرض فيروس كورونا الوبائي 2019 (COVID-19) ، إلى الخلايا البشرية عن طريق الارتباط بالإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 (ACE2) على الرغم من تقارب أعلى. 1 بمجرد ربطه بـ ACE2 ، يتم تحضير بروتين السنبلة الفيروسي بواسطة سيرين بروتياز TMPRSS2 ، والذي يسمح في النهاية بدمج الأغشية الفيروسية والخلوية.

ACE2 هو بروتين رئيسي للفرع الواقي لنظام الرينين-أنجيوتنسين ، والذي يحول أنجيوتنسين (Ang) II ، الببتيد الرئيسي النشط بيولوجيًا لـ RAS ، إلى المضاد الفسيولوجي Angi (1-7).يقوم ACE2 أيضًا باستقلاب Ang I إلى Ang- (1-9) ، والذي يتم تحويله بعد ذلك إلى Ang- (1-7) عن طريق الإنزيم المحول للأنجيوتنسين. Ang- (1-7) يعارض مضيق الأوعية أو proinflammatory أو prooxidant أو proproliferative أو profibrotic الإجراءات التي تمارسها Ang II عبر مستقبلات AT1 (الشكل).

شكل. رسم تخطيطي يمثل المسارات الأيضية الرئيسية التي يقودها الإنزيم المحول للأنجيوتنسين (ACE) والإنزيم المحول للأنجيوتنسين -2 (ACE2) في نظام الرينين-أنجيوتنسين. كما تظهر الأهداف الدوائية لمثبطات الإنزيم المحول للأنجيوتنسين (ACEI) وحاصرات مستقبلات الأنجيوتنسين AT1 (ARB). أنج يشير إلى أنجيوتنسين.

يؤدي ارتباط SARS-CoV بـ ACE2 إلى تقليل تنظيم التعبير ، مما يؤدي إلى زيادة Ang II. 1 يتم التعبير عن الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 1 في العديد من الأعضاء ، ولكنه يتواجد بكثرة في الخلايا الظهارية السنخية والخلايا البطانية الوعائية. 2 هذا من شأنه أن يفسر سبب تعرض الرئة بشكل خاص لفيروس كورونا الجديد. في الواقع ، تبين أن خطورة فيروس السارس المميتة تعتمد على فقدان العوامل التنظيمية الرئيسية في الرئة المتعلقة بتقليل تنظيم الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2. 3

يبدو أن Ang- (1-7) مهم في الحماية من التهاب الرئة والتليف. يثبط heptapeptide موت الخلايا المبرمج للخلايا السنخية ، ويخفف من تنشيط الخلايا البطانية وفقدان وظيفة الحاجز والوذمة ، ويحد من تخليق السيتوكينات المسببة للالتهاب والالتهاب. هذا مهم بشكل خاص لأن كلا من إصابة الرئة الحادة ومتلازمة الضائقة التنفسية الحادة مصحوبة بعاصفة خلوية واستجابة التهابية ساحقة. 2 في الواقع ، يتم التعرف بشكل متزايد على الخلايا البطانية المنشطة كمنظم رئيسي للاستجابة الالتهابية في متلازمة الضائقة التنفسية الحادة.

ارتفاع ضغط الدم هو اعتلال مشترك قد يؤدي إلى تفاقم شدة عدوى فيروس كورونا الجديد. 4 الآليات الأساسية غير واضحة ، لكن الأدوية الخافضة للضغط مثل حاصرات مستقبلات AT1 أو مثبطات الإنزيم المحول للأنجيوتنسين تزيد من تعبير ACE2 في النماذج الحيوانية والبشر. نظرًا لأن ACE2 هو مستقبل الفيروس التاجي الجديد ، فقد تم اقتراح أنه في المرضى الذين عولجوا بهذه الأدوية ، قد تؤدي الزيادة في المستقبلات إلى زيادة العدوى وبالتالي تفاقم المرض. ما إذا كان ينبغي التخلي عن هذه العلاجات لصالح الأدوية المحايدة لـ ACE2 ، مثل حاصرات قنوات الكالسيوم ، قيد المناقشة. 5 ومع ذلك ، لا يوجد في الوقت الحاضر أي دليل قاطع في البشر لصالح هذا الاقتراح.

من ناحية أخرى ، فإن التأثير الوقائي للتعبير الزائد للإنزيم ACE2 مفهوم بشكل أفضل وقد أدى إلى فرضية متناقضة مفادها أن استخدام حاصرات مستقبلات AT1 قد يحمي من إصابة الرئة التي يسببها الفيروس. في نموذج لعدوى فيروس السارس ، أظهر الحصار المفروض على مستقبلات AT1 فعاليته في تخفيف الوذمة الرئوية وإصابة الرئة الشديدة. 3 بالإضافة إلى تخفيف ارتباط Ang II بمستقبلات AT1 الخاصة به ، يمكن تفسير الإجراءات المفيدة لحاصرات مستقبلات AT1 من خلال آليتين محتملتين: (1) ACE2 المستعاد ، الذي ينخفض ​​عادةً أثناء العدوى الفيروسية ، يساعد في تقليل تركيزات Ang II و 3 و (2) هناك جيل متزايد من Ang- (1-7) الواقية.

مطلوب المزيد من الأدلة السريرية والتجريبية لحل هذا الجدل. وفي الوقت نفسه ، نقترح أنه أثناء العدوى الفيروسية ، قد تكون زيادة تركيز Ang- (1-7) أمرًا حيويًا للحماية من تنشيط الخلايا البطانية وتلف الرئة. يجب مراعاة استخدام Ang- (1-7) أو أحد محاكاته من بين استراتيجيات أخرى لمنع الضرر في المرضى المعرضين لخطر كبير.

مصادر التمويل

يتم دعم الدكتور Peiró بمنحة من Plan Nacional de I + D (SAF2017-84776-R).


الوظائف الحرجة للـ ECs في التهاب COVID-19

الاستجابات الالتهابية الفطرية بوساطة مستقبلات المناعة في ECs

يمكن النظر إلى وظائف EC من جانبين في علم المناعة من الاتزان الوعائي وعلم الأمراض. أولاً ، تعتبر ECs جزءًا أساسيًا ومتكاملًا من نظام الأوعية الدموية ، وبالتالي فهي تسبب بشكل جوهري أمراض الأوعية الدموية بمجرد اختلال وظيفتها. ثانيًا ، تتوسط ECs بنشاط الاستجابات الالتهابية أو المناعية في مواقع العدوى أو الإصابة. 21،22 المناعة الفطرية بمثابة خط الدفاع الأول ضد مسببات الأمراض الميكروبية. يعتمد ذلك على عدد محدود من البروتينات الوظيفية أو مستقبلات التعرف على الأنماط (PRRs) ، مثل المستقبلات الشبيهة بالتول (TLRs) ، أو مجال أوليغوميراتزيشن المرتبط بالنيوكليوتيدات (NOD) ، أو الجين المحفز بحمض الريتينويك I ( RIG-I) على غرار المستقبلات (RLRs). عادة ما يحدث الالتهاب عندما تكتشف PRR تلف الأنسجة أو العدوى الجرثومية. 37،38 حتى الآن ، لا تزال معرفتنا بالاستجابات المناعية الفطرية المحددة لـ SARS-CoV-2 في ECs غير معروفة. ومع ذلك ، من المرجح أن تلخص تفاعلات الفيروس مع المضيف التي تنطوي على SARS-CoV-2 العديد من تلك التي تنطوي على أنواع فيروسات أخرى أو عدوى جرثومية بالنظر إلى الآليات المحفوظة للمناعة الفطرية. لوحظ الكشف بوساطة PRR عن الحمض النووي الريبي الفيروسي أحادي الشريطة (ssRNA) والحمض النووي الريبي مزدوج الشريطة (dsRNA) ، والأنماط الجزيئية المرتبطة بمسببات الأمراض (PAMPs) ، والمزيد من التنشيط للاستجابة المناعية الفطرية المضادة للفيروسات أثناء عدوى السارس. 39،40 المعدلات الدوائية الحالية من PRRs بوساطة الاستجابات الالتهابية مدرجة في الجدول 1.

تم اكتشاف TLR9 و 6 في جميع أنواع ECs الخاصة بالأنسجة. 41،42 Poly (I: C) ، وهو تناظري dsRNA اصطناعي ، يمكنه تنشيط TLR1 / 2 و TLR3 و TLR4 مباشرة. 41 عند التنشيط من خلال TLR ، يتم بدء إشارات العامل النووي kappa-B (NF-B) والبروتين كيناز المنشط بالميتوجين (MAPK) عبر عامل التمايز النخاعي 88 (MyD88) و / أو نطاق TIR المحتوي على المحول interferon-(TRIF). 41 تثير هذه العملية استجابة شديدة الالتهاب من خلال تعزيز إنتاج الإنترلوكين (IL) -6 و IL-8 وعامل نخر الورم (TNF) -α و IL-1β وجزيئات الالتصاق (E-selectin و P-selectin و ICAM و VCAM). ونتيجة لذلك ، ترتفع نفاذية الأوعية الدموية عن طريق بروتين الوصلة المعطل claudin-5 وتحريض عوامل التجلط ، مثل عوامل الأنسجة ومثبط منشط البلازمينوجين من النوع 1 (PAI-1) وعامل von Willebrand (vWF) ومنشط urokinase plasminogen Activator (uPa ). 42 بينما لم يتم الكشف عن TLR7 / 8 في ECs ، فإن الخلايا البطانية للوريد السري البشري (HUVECs) تعبر عن TLR3. تنتج 43 ECs أيضًا إنترفيرون من النوع الأول ، مثل IFN-α. يُعرف IFN-α بأنه سيتوكين مهم أثناء الاستجابات المضادة للفيروسات. 43 علاوة على ذلك ، يمكن تنشيط TLR9 في ECs عندما يتم التعرف على DAMPs ، مثل الحمض النووي والبروتينات التي يتم إطلاقها خارج الخلية بعد إصابة الأنسجة. 44 بمجرد تنشيطه ، يتم الكشف عن الفسفرة السريعة لـ NF- B وجزيئات الالتصاق E-selectin و ICAM-1 المستقلة MAPK. بالإضافة إلى ذلك ، يبدو أن التهاب الرئة المرتبط بالإنتان يعتمد على تنشيط عزل العدلات البطاني للتنظيم TLR4 في الرئتين. 45 بشكل جماعي ، فإن المستقبلات TLRs في ECs ليست مهمة فقط في دفاع المضيف ضد العدوى ولكنها تساهم أيضًا في ضعف الأوعية الدموية الدقيقة والالتهابات أثناء العدوى الجهازية.

إن بروتينات NOD1 و NOD2 هما عضوان من عائلة NLR ، والتي تعمل بمثابة PRRs السيتوبلازمية. 41 أنواع مختلفة من ECs ، مثل HUVECs والأوعية الدموية الدقيقة والخلايا البطانية الأبهرية البشرية ، تعبر عن NOD1. 41،46 عند التحفيز الميكروبي ، ثبت أن ECs تنتج IL-8 بطريقة تعتمد على NOD1. يتم تصنيف البروتينات NLR التي تحتوي على PYD (NLRPs) على أنها مجموعة فرعية أخرى من NLR. تتفاعل NLRPs مع ASC و caspase-1 ، وتشكل مجمعات متعددة البروتينات تسمى inflammasomes. 48 Inflammasomes (على سبيل المثال ، NLRP1 و NLRP3) تنظم المعالجة المحللة للبروتين من proIL-1β و proIL-18 إلى أشكال ناضجة ، وموت الخلية الالتهابي يسمى التهاب الحنجرة. تم تأكيد التعبير 41 NLRP1 / 3 و ASC و caspase-1 في ECs في الرئة والأوعية الدموية. تم اعتبار مسار NLRP3 مؤخرًا هدفًا جديدًا لعلاج COVID-19. 51

الجين 5 المرتبط بتمايز الورم الميلانيني RIG-I (MDA5) هما مستشعران هامان من أجهزة الاستشعار السيتوبلازمية للحمض النووي الريبي الفيروسي ، والتي تنتمي إلى عائلة RLRs من PRR. تم اكتشاف 37،41،42 RIG-I و MDA5 ECs (على سبيل المثال ، HUVECs) ، ويتم تنظيم تعبير RIG-I عند التحفيز الميكروبي. 37،41 الذي يحتوي على جزيء محول يحتوي على CARD من البروتين المضاد للفيروسات (MAVS) يعمل بواسطة كل من RIG-I و MDA5 ، والذي بدوره يحفز مسارات الإشارات مما يؤدي إلى استجابة IFN-α / المعتمدة على IRF3 / 7 و NF- نسخ الجينات الالتهابية المعتمدة على. 37

ECs في الاستجابات المناعية التكيفية

مجمعات التوافق النسيجي الرئيسية الببتيدية (MHCs) وجزيئات التكلفة مطلوبة عمومًا لتنشيط الخلايا التائية. 52 تصطف جميع الأوعية الدموية بواسطة ECs لتشكل حاجزًا بين الخلايا المناعية في الدم والأنسجة المتني ، وظل التفاعل بين الخلايا التائية والمفاصل الأوروبية المقيمة في العضو بعيد المنال في الغالب. ومن المثير للاهتمام ، أن دراسة حديثة باستخدام النسخ أحادية الخلية وجدت أنه تم اكتشاف مستويات عالية من الجينات المرتبطة بعرض مستضد من الفئة الثانية من معقد التوافق النسيجي الكبير في نوع فرعي من الشعيرات الدموية الرئوية ، 53 مما يشير إلى دور محتمل كخلايا تقديم المستضد (APCs) لتعمل. في المراقبة المناعية ضد مسببات الأمراض التنفسية لهذا النوع الفرعي EC. ومع ذلك ، نظرًا لعدم وجود جزيئات تكلفة CD80 / CD86 على سطح الخلية ، فإن ECs غير قادرة على تنشيط الخلايا التائية الساذجة. وبالتالي ، من المحتمل أنها تعمل كمدافع رشاشة شبه احترافية. 54 عند إعادة تنشيطه بواسطة IFN-(مشتق في الغالب من خلايا Th1) للتعبير عن جزيئات معقد التوافق النسيجي الكبير ، تحفز ECs بشكل فعال إنتاج السيتوكين وانتشار خلايا الذاكرة التائية CD4 / 8. تم الإبلاغ عن أن ECs الأوعية الدموية الدقيقة يمكن أن تحفز الهجرة عبر البطانة لخلايا الذاكرة المستجيبة CD4 T. 23 بالإضافة إلى ذلك ، قد تعمل ECs من الأنسجة الملتهبة بشكل مزمن في استقطاب الاستجابات الالتهابية المتعلقة بالمناعة التكيفية. تم الكشف عن فرط نشاط الخلايا التائية ، الذي يتميز بزيادة عدد خلايا Th17 وفرط نشاط خلايا CD8 T ، في الدم المحيطي للعدوى بفيروس COVID-19. 56 مجتمعة ، تشير الأدلة أعلاه إلى أن تفاعل ECs مع الخلايا التائية قد يؤدي إلى التهاب مفرط في حالات العدوى الشديدة بـ COVID-19.

تجنيد الكريات البيض المعتمد على جزيء الالتصاق البطاني

تشكل الموصلات الأوربية الوريدية الموقع الأساسي لتهريب الكريات البيض من الدم المنتشر إلى الأنسجة. من المفترض أن تشارك ECs في تجنيد الكريات البيض من مجرى الدم إلى مواقع العدوى والالتهاب. 23 أثناء عملية عدوى SARS-CoV-2 ، السيتوكينات الالتهابية لـ IL-1 و TNF-α المشتقة من كريات الدم البيضاء المنشطة ، ترتبط بالمجالات خارج الخلية لمستقبل IL-1 1 (IL-1R1) ومستقبل TNF 1 (TNFR1) على سطح الغشاء البطاني ، مما يؤدي إلى زيادة شلالات كيناز المختلفة ويؤدي إلى تنشيط NF-κB والبروتين المنشط 1 (AP-1). 23 تحفز عوامل النسخ هذه جزيئات الالتصاق (ICAM-1 و VCAM-1 و E-selectin و P-selectin). تم تعريف VCAM-1 في الأصل على أنه ليجند بطاني مستقل عن CD11 / CD18 للكريات البيض أحادية النواة. 23 يتعرف على تكامل α4β1 و α4β7 من الكريات البيض. ظهر VCAM-1 مؤخرًا كجزيء التصاق رئيسي محفز معبر عن EC يتوسط في تجنيد وحيدات في مواقع الإصابة والعدوى. 23 ICAM-1 ، المعبر عنه على سطح البطانة والأوعية الدموية المحيطية ، يتم تنظيمه في الآفات. من خلال الارتباط مع كريات الدم البيضاء β2 إنتغرينات (CD11 / CD18) ، يدعم ICAM-1 توقيف الكريات البيض والالتصاق القوي ويتوسط في انتقال الخلايا الوحيدة والخلايا الليمفاوية. تمتلك العدلات والخلايا التائية ، وخاصة الخلايا التائية التنظيمية (Tregs) في الدم المحيطي للإنسان ، بروابط E-selectin ، وبالتالي يتم تجنيدها. 23،57 P-selectin عبارة عن جزيء التصاق ، ويتم التعبير عنه في الغالب على الصفائح الدموية والبطانة ، مما يعزز دوران الكريات البيض والالتصاق وتناسخ الكريات البيض عن طريق الارتباط ببروتين سكري يشبه الميوسين المرتبط بثاني كبريتيد ، P-selectin ligand-1 (PSGL) -1) عن طريق الكريات البيض. يلعب 58 P-selectin دورًا مهمًا في تفاعلات خلايا الدم البيضاء البطانية ، خاصة في تعديل المسارات الالتهابية والدفاع ضد العدوى. 58 كما ذكرنا سابقًا ، تزداد بشكل كبير مستويات المصل لجزيئات الالتصاق (ICAM-1 و VCAM-1 و E-selectin و P-selectin) في حالات العدوى الشديدة بفيروس COVID-19. 25،59 خزعة تشريح من الرئتين المصابة بـ SARS-CoV-2 تُظهر التجميع أحادي النواة ومتعدد الأشكال ، مصحوبًا بالمفاصل الأبوطوزيكي. 60 نتوقع أن جزيئات الالتصاق هذه التي عبر عنها ECs تتوسط تسلل الخلايا الالتهابية وإصابة EC التي تسببها الكريات البيض تساهم في الالتهاب ، لا سيما في الشعيرات الدموية أثناء تقدم COVID-19. يتم سرد المُعدِّلات الدوائية الحالية التي تعمل بشكل مباشر أو غير مباشر على توظيف الكريات البيض بوساطة التنشيط البطاني في الجدول 2.


ACE2 والجزيئات المرتبطة به في العضلات الهيكلية في RAS

مسار ACE2-Ang 1-7 كنظام تنظيم مضاد لـ RAS

شكل 1 آيس 2، الموجود على كروموسوم Xp22 ، يتم نسخه إلى ببتيداز غشائي متكامل من النوع الأول بهوية 40٪ وتشابه بنسبة 61٪ مع ACE [6]. كشف تحليل هيكلي حديث أن الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 يشكل جهازًا متماثلًا ، على الأقل في وجود ناقل الأحماض الأمينية B0AT1 ، والذي يعمل ACE2 كبروتين مساعد [7]. على النقيض من الإنزيم المحول للأنجيوتنسين ، الذي يعمل كببتيدل ديبيبتيداز ، فإن المجال الخارجي لـ ACE2 يشق الأنجيوتنسين 2 [1-8] (Ang II) في Ang 1-7 باعتباره أحادي الكربوكسيل ببتيداز. يقوم ACE2 البشري أيضًا بشق الأنجيوتنسين 1 إلى الأنجيوتنسين 1-9 بفاعلية تحفيزية أقل من تلك الموجودة في Ang II إلى Ang 1-7 ، ومع ذلك ، فإن التأثير غائب عن الفئران ACE2 [6،8]. في عام 2003 ، سانتوس وآخرون. أظهر أن ارتباط Ang 1-7 بالكلى قد تم إلغاؤه في الفئران التي تعاني من نقص في Mas ، وهو مستقبل مقترن ببروتين G والذي كان يُنظر إليه سابقًا على أنه أحد الجينات الورمية الأولية ، وحدد Mas كمستقبل وظيفي لـ Ang 1-7 [9 ]. بينما تم الإبلاغ عن النشاط البيولوجي لـ Ang 1-7 خلال الثمانينيات [10-12] ، فإن تحديد الإنزيم الأساسي والمستقبل لإنتاج الببتيد وربطه ، على التوالي ، قد دفع الدراسات لتوضيح دور Ang 1-7 في الظروف المرضية والفسيولوجية [2،13]. تتوسط Ang 1-7 مسارات إشارات متعددة داخل الخلايا ، بما في ذلك تخليق أكسيد النيتريك بشكل أساسي عبر مسار AKT-eNOS ، وتثبيط إشارات كيناز MAP (ERK1 / 2 ، و p38 ، و JNK) ، وتثبيط إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) عن طريق أوكسيدات NADPH ، تثبيط إشارات TGF-β-SMAD ، وتعديل استجابة إشارات cAMP [13-17]. تعمل مسارات الإشارات هذه على توسيع الأوعية ، ومضاد التكاثر ، ومضاد الالتهاب ، ومضاد التليف في Ang 1-7 [13-17]. بينما ثبت أن Ang 1-7 تمارس تأثيرها من خلال الارتباط بـ Mas في العديد من الدراسات باستخدام الحذف الجيني لمضادات Mas أو Mas الخاصة (على سبيل المثال ، A779) [13،15،16،18-20] ، هناك العديد من الدراسات الأخرى المستقبلات التي يمكن أن ترتبط بـ Ang 1-7 وتمارس استجابات خلوية وعضوية ذات صلة بيولوجيًا ، بما في ذلك MrgD ، وهو عضو في مستقبلات البروتين G المرتبطة بـ Mas [21،22] ومستقبلات Ang II من النوع 2 [17،23،24]. يرتبط Ang 1-7 أيضًا بمستقبلات Ang II من النوع 1 (AT1) ويعمل كمحفز متحيز لـ AT1 [25،26]. بالإضافة إلى ذلك ، تم الإبلاغ مؤخرًا عن أن الألماندين (Ala-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe) ، وهو ببتيد داخلي يختلف عن Ang 1-7 (Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His) –Pro-Phe) في حمض أميني N- طرفي واحد ويتم قطعه من الأنجيوتنسين A بواسطة ACE2 ، ويرتبط بـ MRGD ويثير استجابة عضو واقية مشابهة لـ Ang 1-7 [27-30]. حتى الآن ، لم يتم الإبلاغ عن أي دراسة حول وظيفة الألماندين في العضلات الهيكلية. في حين أن ACE2 هو محدد رئيسي في تنظيم مستوى الأنسجة في Ang 1-7 ، فإن neprilysin ، وهو بروتين غشائي متكامل من النوع الثاني يشق الأنجيوتنسين I إلى Ang 1-7 يشارك أيضًا في تنظيم مستويات الأنسجة والبلازما في Ang 1. 7 [30–32]. يشق نيبريليسين أيضًا Ang 1-7 إلى الببتيدات الصغيرة بالإضافة إلى ACE [33،34] ، وقد ثبت أن الأنجيوتنسين 1-2 ، المنتج المحلل للبروتين للنيبريليسين ، له صلة بإفراز الأنسولين في البنكرياس [35]. بشكل جماعي ، بينما يمثل محور ACE2-Ang 1-7-Mas مسارًا رئيسيًا لمواجهة تنشيط محور ACE-Ang II-AT1 ، كشفت التطورات الأخيرة في البحث عن مسارات بديلة متعددة ووسعت بشكل متنوع الشبكة التنظيمية لـ RAS [ 30].

شلالات من RAS و ACE2

* ينتج مع نزع الكربوكسيل الأنزيمي من Ang II. الاختصار: Ang I، angiotensin I.

* ينتج مع نزع الكربوكسيل الأنزيمي من Ang II. الاختصار: Ang I، angiotensin I.

فيما يتعلق بالنشاط الخاص بالأعضاء لـ ACE2 ، فإن إفراز المجال الخارجي لـ ACE2 بواسطة disintegrin و metalloproteinase 17 (ADAM17) ، المعروف أيضًا باسم إنزيم تحويل TNFα (TACE) ، هو تفاعل بيولوجي مهم يحط من نشاط الأنسجة ACE2 في ظل ظروف مرضية متعددة [ 36-39]. يزيد نشاط ADAM17 استجابة لمحفزات التهابية مختلفة [40،41] ، وقد ثبت أن ACE2 القابل للذوبان المنتشر عن طريق التخلص من ADAM17 علامة بيولوجية محتملة لأمراض القلب والأوعية الدموية البشرية ، بما في ذلك فشل القلب [42-44] ، الرجفان الأذيني [45] ، أمراض الكلى المزمنة [46] ، تصلب الشرايين [47] ، احتشاء عضلة القلب [48] والسكتة الدماغية [49]. Petel et al. ذكرت أن Ang II يزيد من نشاط عضلة القلب لـ ADAM17 ، في حين أن مستويات البروتين ACE2 لعضلة القلب ونشاطها ينخفض ​​بشكل كبير مع زيادة مقابلة في نشاط ACE2 في البلازما [37]. علاوة على ذلك ، تم الإبلاغ عن أن عضلات الهيكل العظمي ADAM17 تزداد في العديد من الحالات ، بما في ذلك زيادة السمنة [50] ومرض السكري من النوع 2 [51] ، وأن ناهض PPARγ يقلل من نشاط العضلات ADAM17 [52] ومع ذلك ، فإن العلاقة بين ADAM17 و ACE2 في العضلات الهيكلية لم يتم التحقيق فيها بعد. بالإضافة إلى ذلك ، لا تتوفر حاليًا دراسات حول تغيير مستويات ACE2 المنتشرة في المرضى الذين يعانون من اضطرابات العضلات.

ACE2-Ang 1-7 في العضلات الهيكلية

تلعب العضلات الهيكلية دورًا رئيسيًا في تنظيم ليس فقط الجهاز الحركي ولكن أيضًا استطاب التمثيل الغذائي عن طريق تعديل حساسية الأنسولين [53،54]. تفعيل مسار RAS الكلاسيكي: لقد ثبت أن محور ACE-Ang II-AT1 يشارك في التسبب في أمراض العضلات لتعزيز الاضطرابات في الجهاز الحركي أو حساسية الأنسولين ، أي ضياع العضلات المصحوب بإعادة تشكيل العضلات المرضية [55-57] أو مقاومة الأنسولين [58،59] ، على التوالي. فيما يتعلق بمسار ACE2-Ang 1-7 كنظام تنظيمي مضاد لمحور ACE-Ang II-AT1 ، ركزت الدراسات السابقة في العضلات الهيكلية بشكل أساسي على الدور الوقائي لـ Ang 1-7 في إعادة تشكيل العضلات المرضية ومقاومة الأنسولين ، والأدلة المباشرة التي تربط الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 بهذه الأمراض صغيرة نسبيًا. تمت مراجعة دور Ang 1-7 في اضطرابات العضلات على نطاق واسع سابقًا [13،60-63]. في هذا القسم ، نقدم بإيجاز دليلًا حيويًا لدعم الدور الوقائي لـ Ang 1-7 في اضطرابات العضلات ومناقشة الدور المعقول لـ ACE2 في RAS العضلي ضمن نطاق الأدلة المتاحة.

إعادة بناء العضلات

الشكل 2 الهزال العضلي هو مرض يسببه عدة عوامل بما في ذلك العوامل الموجودة خارج العضلات الهيكلية ، مثل الاضطرابات في الخلايا العصبية الحركية ، والتغذية غير الطبيعية ، والالتهاب الجهازي ، وعدم الحركة الجسدية ، وضعف الإمداد بالأكسجين [64]. هنا ، نناقش فقط الأمراض التي يمكن أن تسبب مباشرة إعادة تشكيل العضلات ، مما يؤدي إلى هزال العضلات. تتضمن إعادة تشكيل العضلات الباثولوجية تعديلين أساسيين في العضلات الهيكلية بما في ذلك الضمور والتليف الذي يمكن أن يحدث بشكل مستقل ولكن يعمل بشكل تآزري على تعديل تطور الاضطرابات الوظيفية في حالات مرضية متعددة مع هزال العضلات. يمكن أن تتضمن عملية إعادة تشكيل العضلات أيضًا خللًا بطانيًا في دوران الأوعية الدقيقة للعضلات ، ويتم مراجعة تأثير RAS على الخلل البطاني في العضلات الهيكلية في القسم التالي. كما تمت مراجعته سابقًا ، يلعب تنشيط مسار RAS الكلاسيكي دورًا محوريًا في تطوير إعادة تشكيل العضلات المرضية من خلال تعزيز الضمور والتليف في العضلات الهيكلية [60،63]. باختصار ، ينجم ضمور العضلات عن خلل في تخليق البروتين وتدهوره. يضعف Ang II تخليق البروتين العضلي بشكل أساسي عن طريق تثبيط مسار IGF-1-AKT-mTOR. يتم أيضًا تعزيز تدهور البروتين بواسطة Ang II من خلال تحريض مسارات إشارات الخلايا المتعددة بما في ذلك التنظيم الأعلى للأتروجين ، مثل atrogin-1 و MuRF-1 ، والذي يؤدي إلى تحلل البروتين المعتمد على ubiquitin-proteasome وموت الخلايا المبرمج العضلي المعتمد على caspase [ 60،63]. يُعزى عدم التوازن في تخليق البروتين وتدهوره الناجم عن Ang II في المقام الأول إلى إنتاج ROS المعتمد على NOX2 والظواهر الخلوية اللاحقة بما في ذلك الالتهاب المعتمد على NfκB وتلف الميتوكوندريا [60،63].

يعمل محور ACE2-Ang 1-7-Mas على تنظيم عمل محور ACE-Ang II-AT1 في تطوير إعادة تشكيل العضلات المرضية

يمكن أن يحدث التليف العضلي عندما يتم استبدال الألياف العضلية التالفة أو الضامرة بأنسجة ضامة ، ويلعب Ang II دورًا محوريًا في تعزيز تليف العضلات [60،63]. إن إنتاج ROS المعتمد على NOX2 هو أيضًا مسار إشارات أولية للتليف الناجم عن Ang II ، ويعتبر عامل نمو النسيج الضام الناجم عن TGF ‐ β و TGF β لاعبين رئيسيين في هذه العملية [60،63،65]. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن تتضمن عملية التليف الناجم عن Ang II التهاب الأنسجة الناجم عن NfκB وضعف القدرة التجديدية لخلايا سلف العضلات والخلايا الساتلة ، في حين أن الجدل قائم بسبب الدراسات المتنافسة حول تأثير Ang II على تجديد العضلات [60 ، 66،67].

يُفسر الفهم الحالي للتأثير المفيد لـ Ang 1-7 على إعادة تشكيل العضلات بشكل أساسي من خلال تثبيط الظاهرة المرتبطة بـ Ang II للحث على الضمور والتليف. تم اقتراح الدور البيولوجي لإشارات Ang 1-7 من خلال Mas من خلال دراسة أظهرت أن الظروف المرضية التي تحفز إعادة تشكيل العضلات ، بما في ذلك تجميد وحقن Ang II و LPS ، زادت من تعبير Mas للعضلات [68]. تمشيا مع هذا ، وجدنا تلك العضلات ماس تم تنظيمه بمعدل 3.7 أضعاف في فئران تسوكوبا ذات ضغط الدم البالغة من العمر 15 شهرًا والتي تحمل الرينين البشري ومولد الأنجيوتنسين ، مما يشير إلى أن ماس يمكن أن يزيد كتعويض عن الحمل الزائد المزمن لـ Ang II [4]. يخفف تسريب Ang 1-7 من ضعف العضلات في حالات مرضية متعددة ، بما في ذلك تسريب Ang II [69-71] ، والضمور العضلي [72،73] ، والضمور الناجم عن عدم الاستخدام [74،75] ، وأمراض الكبد المزمنة [76] ، والسباحة الشاملة ممارسة [77] ودنف السرطان [78] في القوارض. استخدمت معظم هذه الدراسات الحذف الجيني [72،75] أو التثبيط الدوائي [69-72] للماس لإظهار اعتماد ماس في التأثيرات التي يسببها Ang 1-7 على إعادة تشكيل العضلات المرضية ، بينما مورفي وآخرون. استخدام الفئران الخاصة بالعضلات المفرطة في التعبير ماس أو ناهض ماس لإظهار التأثيرات الوقائية للماس في هزال العضلات الناجم عن السرطان [78].

على عكس خطوط الأدلة المتعددة لـ Ang 1-7 و Mas ، توجد حاليًا دراسة واحدة فقط تبحث في الدور المحتمل لـ ACE2 في إعادة تشكيل العضلات المرضية [79]. في هذه الدراسة ، ريكيلمي وآخرون. ذكرت أن نشاط الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 ومستويات البروتين في العضلات الهيكلية قد ازدادا عن طريق الحث الجيني للحثل العضلي أو الإصابة المزمنة مع BaCl المحلي.2 حقنة. قد يعني هذا آلية تعويض لتحسين المسار الوقائي لـ RAS ضد إصابة العضلات ، جنبًا إلى جنب مع زيادة ماس في العديد من أمراض العضلات [4،68]. أظهروا أيضًا أن حقن العضلات بالفيروس الغدي المشفر للإنزيم ACE2 البشري أدى إلى انخفاض مستويات الكولاجين 1 وتسلل البلاعم في العضلات المصابة ، مما يشير إلى أن إنتاج Ang 1-7 المعزز عن طريق التعبير المفرط لـ ACE2 يساهم في الحد من الأمراض في ضمور العضلات [79]. ومع ذلك ، فإن الأهمية البيولوجية لـ ACE2 الذاتية في إعادة تشكيل العضلات لم يتم تحديدها بعد ، حيث لا يزال من غير المعروف ما إذا كان مستوى Ang 1-7 الناتج عن ACE2 الداخلي كافياً للمساهمة في الحماية من تطور إعادة تشكيل العضلات المرضية. علاوة على ذلك ، أكونا وآخرون. ذكرت أن الحذف الجيني أو المضاد A779 للماس أدى إلى تدهور البنية العضلية وزيادة التليف وإشارات TGF-مع تناقص قوة العضلات في فئران MDX المضطربة ، مما يشير إلى أن ماس داخلي المنشأ في العضلات الهيكلية مهم للحماية من إعادة تشكيل العضلات المرضية [72]. ومع ذلك ، نظرًا للمسار البديل لإنتاج Ang 1-7 بواسطة neprilysin [30-32] ، فإنه يظل غير محدد ما إذا كان الدور المقترح للماس الداخلي في إعادة تشكيل العضلات مرتبطًا تمامًا بالنشاط التحفيزي لـ ACE2. قد تكون الدراسات التي تستخدم الحيوانات التي تعاني من نقص في وظيفة ACE2 مفيدة في استخلاص النتائج حول هذا الموضوع.

مقاومة الأنسولين في العضلات

تشير الأدلة المتراكمة في الشكل 3 إلى أن مقاومة الأنسولين في العضلات الهيكلية الناتجة عن تنشيط مسار RAS الكلاسيكي تتضمن في المقام الأول آليتين مستقلتين: اضطراب الدورة الدموية في التوصيل المحلي للأنسولين والجلوكوز إلى العضلات الهيكلية وخلل تنظيم إشارات الخلايا التي يتوسطها الأنسولين من أجل امتصاص الجلوكوز في العضلات الهيكلية [58-60]. الأول يرتبط بانخفاض إمداد الدم المحتمل بسبب تضيق الأوعية بوساطة Ang II والخلل البطاني في دوران الأوعية الدقيقة للعضلات. يتضمن الخلل البطاني بوساطة Ang II مسارات إشارات متعددة ، مما يؤدي في النهاية إلى انخفاض إنتاج بيروكسيد النيتريك [80-82]. هذا الأخير هو انتقال مخفض لناقل الجلوكوز السيتوبلازمي 4 (GLUT4) إلى غشاء البلازما استجابةً لارتباط الأنسولين بمستقبلات الأنسولين في خلايا العضلات الهيكلية. هذه العملية ناتجة بشكل أساسي عن ROS الناتج عن التنشيط المستحث بـ Ang II للعضلات NOX2 [83] والذي يتداخل مع سلاسل الإشارات داخل الخلايا من الأنسولين ، بما في ذلك ركيزة مستقبلات الأنسولين ، و phosphatidylinositol-3-kinase ، و 3-phosphoinositide المعتمدة كينازات و AKT [58-60]. أشارت الدراسات السابقة إلى أن Ang 1-7 يعاكس الآليات الخلوية لـ Ang II في التوسط في مقاومة الأنسولين بشكل أساسي من خلال مستقبل ، Mas. أولاً ، أكدت العديد من الأدلة أن Ang 1-7 يمكن أن يعيد الخلل البطاني في الأعضاء المختلفة عن طريق مواجهة ضعف إنتاج NO الناجم عن Ang II [84-91]. تم إثبات تورط ماس في الحماية البطانية التي يسببها Ang 1-7 من خلال الخلل البطاني في القوارض ذات الجينات [92-94] أو الحصار الدوائي للماس [95]. ومن المثير للاهتمام ، أنه تم الإبلاغ مؤخرًا عن أن تكوين الأوعية الدموية للهيكل العظمي وتشكيل أنبوب الخلايا البطانية تم تحفيزهما بواسطة Ang 1-7 وتم تثبيته إما عن طريق الحذف الجيني لـ AT1a أو الحصار الدوائي لـ Mas في فئران Dahl الحساسة للملح [96] ، مما يدعم النتيجة السابقة التي تفيد بأن يعتبر التفاعل بين AT1 و Mas محوريًا في دور Ang 1-7 في الوظيفة البطانية [97]. على الدوام ، تبين أيضًا أن الإنتاج المحتمل لـ Ang 1-7 بواسطة ACE2 يساهم في حماية البطانة. الإفراط في التعبير أو التنشيط الدوائي لـ ACE2 يحسن الوظيفة البطانية في الشرايين الجهازية [98-100] والشرايين الرئوية [101]. ومع ذلك ، لا يوجد دليل مباشر يدعم أن الأدوار الوقائية المحتملة لـ ACE2 و Ang 1-7 و Mas في حساسية الأنسولين تُعزى حقًا إلى تحسين دوران الأوعية الدقيقة في العضلات الهيكلية. تم أيضًا إظهار التأثير المباشر لـ Ang 1-7 بشكل أساسي من خلال ماس في نقل GLUT4 بوساطة الأنسولين من خلال عدة سطور من الأدلة في الأنسجة الدهنية [102،103] والقلب [104] والكبد [103] والعضلات الهيكلية [103،105،106]. في الآونة الأخيرة ، تم الإبلاغ عن أن تأثير التحسس للأنسولين لممارسة الرياضة قد تم إلغاؤه بواسطة ناهض Mas A779 الانتقائي في العضلات الهيكلية ، مما يشير إلى أن Ang 1-7 ، التي تعمل من خلال Mas ، تشارك في تعزيز حساسية الأنسولين الناجم عن التمرين [107]. فيما يتعلق بربط ACE2 مع استقلاب الجلوكوز العضلي ، وجدنا سابقًا أن نقص ACE2 يبالغ في مقاومة الأنسولين وتحمل الجلوكوز استجابة لنظام غذائي عالي الدهون وتسريب Ang II [108].


يود المؤلفون أن يشكروا البروفيسور ران فريدمان من قسم الكيمياء والعلوم الطبية الحيوية ، جامعة لينيوس ، كالمار ، السويد ، على تعليقاته الثاقبة.

ACE2 ، الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 AP-2 & # x003B1 ، تنشيط بروتين رابط محسن 2 alpha C / EBP & # x003B2 ، CCAAT / محسن بروتين ربط بيتا COVID-19 ، مرض فيروس كورونا 2019 GCF ، عامل ربط الحمض النووي المتسلسل الغني GIT ، الجهاز الهضمي GR - & # x003B1 ، مستقبلات الجلوكوكورتيكويد alpha NF-AT1 ، العامل النووي للخلايا التائية المنشطة PAX5 ، الصندوق المقترن 5 RXR - & # x003B1 ، مستقبلات retinoid X alpha SNP ، تعدد الأشكال أحادي النوكليوتيد TFBS ، عامل النسخ ، موقع الربط TMPRSS2 البروتياز الغشائي ، سيرين 2 VDR ، مستقبلات فيتامين D XBP-1 ، بروتين ربط X-box 1.


الأميودارون يغير الإندوسومات المتأخرة ويمنع عدوى فيروس كورونا السارس في مستوى ما بعد إندوسومي

يتداخل الأميودارون مع مسار الالتقام ، ويمنع تحلل البروتين ، ويسبب تكوين فجوات ، لكن امتصاص الدواء وتوزيعه داخل الخلايا ، وأصل الفجوات ، والعواقب الوظيفية لتراكم الأميودارون تظل غير واضحة. كان هدفنا دراسة امتصاص الأميودارون ، وتوضيح أصل الفجوات ، والتحقيق في تأثير الأميودارون على دورة حياة الفيروس التاجي المسؤول عن متلازمة الجهاز التنفسي الحادة الوخيمة (سارس) ، والتي ، لدخول الخلايا ، تعتمد على الانقسام التحلل للبروتين. بروتين سبايك فيروسي بواسطة كاثيبسين البروتين الداخلي L. باستخدام الضامة السنخية ، درسنا امتصاص 125 I-amiodarone و 125 I-B2 ، وهو نظير يفتقر إلى المجموعة الجانبية diethylamino-β-ethoxy ، وقمنا بتحليل تأثيرات الأميودارون على التوزيع من الواسمات داخل الجسم وعلى امتصاص الصبغة الموجه للحموضة. علاوة على ذلك ، باستخدام خلايا Vero ، اختبرنا تأثير الأميودارون على في المختبر انتشار فيروس كورونا سارس. لقد وجدنا أن (1) يرتبط الأميودارون بأغشية الخلايا المختلفة ويتراكم في العضيات الحمضية (2) تعتبر مجموعة diethylamino-β-ethoxy محددًا مهمًا للامتصاص (3) تتضخم الفجوات التي تتشكل عند التعرض للأميودارون داخل الجسيمات الداخلية المتأخرة (4) الأميودارون يمنع الانتشار في المختبر من فيروس كورونا السارس و (5) انشقاق التربسين لبروتين الشوكة الفيروسية قبل الإصابة ، والذي يسمح بدخول الفيروس عبر غشاء البلازما ، لا يضعف نشاط الأميودارون المضاد للفيروسات. نستنتج أن الأميودارون يغير الأجزاء المتأخرة من مسار الالتقام ويمنع عدوى فيروس كورونا السارس من خلال العمل بعد انتقال الفيروس من خلال الجسيمات الداخلية.

توضح هذه المقالة أن الفجوات تتضخم في وقت متأخر من الإندوسومات وأن الأميودارون يثبط في المختبر عدوى فيروس كورونا المتلازمة التنفسية الحادة الوخيمة التي تعمل بعد إيصال الجينوم الفيروسي إلى السيتوبلازم.

تتمثل إحدى النتائج الغريبة لإعطاء الأميودارون في تكوين فجوات ، وأجسام متضمنة متعددة الطبقات ورواسب شبيهة بالبلورات في أنواع مختلفة من الخلايا ، ومع ذلك ، فإن أصل هذه الهياكل غير معروف أيضًا (3 ، 6).

لتوضيح بعض هذه النقاط ، باستخدام الضامة السنخية ، قمنا بتحليل الامتصاص والتوزيع داخل الخلايا لـ 125 I-amiodarone و 125 I-B2 ، وهو نظير يفتقر إلى مجموعة diethylamino-β-ethoxy (7). علاوة على ذلك ، باستخدام الفحص المجهري متحد البؤر ، قمنا بتحليل تأثيرات الأميودارون على توزيع علامات الإندوسومات المبكرة والمتأخرة وعلى امتصاص الصبغة الموجه للحموضة. أخيرًا ، نظرًا لأن إصابة الخلايا المستهدفة بالفيروس التاجي (CoV) المسؤول عن متلازمة الجهاز التنفسي الحادة الوخيمة (SARS) تعتمد على الانقسام الداخلي لبروتين السطح الفيروسي ، فقد درسنا أيضًا تأثير الأميودارون على في المختبر انتشار هذا العامل المعدي الناشئ حديثًا (8).

SARS-CoV هو فيروس مغلف ، مع جينوم الحمض النووي الريبي الموجب الذي تقطعت به السبل ، يقدم نتوءات على شكل مضرب مصنوعة من قواطع من بروتين السنبلة (S). تتمثل الخطوة الأولى في دورة حياة الفيروس في ارتباط البروتين S بمستقبلاته ، الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 (ACE2). بعد ذلك ، يتم امتصاص الفيروس عن طريق الالتقام الخلوي بوساطة مستقبلات ، وينتهي في حجرة داخلية حمضية حيث يتم شق البروتين S بروتينيًا بواسطة البروتياز كاثيبسين L. الجينوم في السيتوبلازم (9-16). بعد أن وجدنا أن الأميودارون يزعج الأجزاء المتأخرة من مسار الالتقام ، قمنا باختبار تأثيره على دورة حياة فيروس السارس.

كانت الأجسام المضادة من Stressgen Biotechnologies ، Eugene ، أو (Rab4 and Fas) Ancell ، Bayport ، MN (CD63) ، Abcam ، كامبريدج ، المملكة المتحدة (EEA1) وأثينا للأبحاث والتكنولوجيا ، أثينا ، كاليفورنيا (cathepsin L).

كان أميودارون من سيجما (سانت لويس ، ميزوري). تم تصنيع B2 (2-بيوتيل -3 (3 ، 5′-diiodo-4-hydroxy) -benzofuran) كما ورد (7).

تم تحضير 125 I-amiodarone (نشاط محدد 34.7 Ci / mmol) و 125 I-B2 (3.36 Ci / mmol) باتباع طريقة Bellen وزملاء العمل (17).

تم قياس الذوبان في الماء والتفاعل مع أغشية الأميودارون و B2 كما تم الإبلاغ عنها (18 ، 19).

تم الحفاظ على خلايا Vero (ATCC CCL-81) في GlutaMAX I (Gibco ، Carlsbad ، CA) ، 1 ٪ بنسلين ستربتومايسين ، 5 ٪ مصل بقري جنيني معطل بالحرارة (HyClone ، Logan ، UT). تم الحفاظ على الضامة السنخية ، التي تم الحصول عليها بعد الموافقة المؤسسية والموافقة الخطية من فصوص الرئة المستأصلة لسرطان الرئة ، في Ringer Buffered 0.1 ٪ Albumin (RBA) (4).

الضامة ، تتعرض لمدة 60 دقيقة إلى متوسط ​​أو 2.0 ميكرومتر من أكسيد فينيلارسين ، 2.5 ملي مولار هيدروكلوريد أمانتادين ، 1.5 ميكرومتر فلبيني ، 10 ميكرومتر سيتوتشالاسين د ، 0.1 ميكرومتر ورتمانين ، 0.1 ميكرومتر بافيلوميسين أ1، أو 0.1 ميكرومتر concanamycin A (كلها من Sigma) ، تم تحضينها لمدة 0 إلى 90 دقيقة مع 0.2 ميكرومتر 125 I-amiodarone أو 125 I-B2 قبل قياس النشاط الإشعاعي للخلية. في بعض التجارب ، تم اختبار أجزاء من المادة الطافية بعد النووية (4 ، 20) من أجل النشاط الإشعاعي ، البروتين (21) ، أريل سلفاتاز (22) ، Rab4 ، CD63 ، وفاس (بواسطة النشاف الغربي).

البلاعم التي تعرضت لـ 0 إلى 10 ميكرومتر من الأميودارون لمدة 24 ساعة تم تثبيتها ، وتخللها ، واحتضانها بأجسام مضادة لـ EEA1 ومضادة لـ CD63 ، وتعرضت لـ alexa 488- أو alexa 546- أضداد ثانوية مترافقة (Molecular Probes Europe BV ، Leiden ، هولندا) ، وتحليلها عن طريق الفحص المجهري المسح بالليزر (زايس LSM510 زايس ، ميلان ، إيطاليا) (23).

تم تعريض البلاعم ، المحتضنة بـ 0 إلى 10 ميكرومتر أميودارون لمدة 24 ساعة ، لمدة 30 دقيقة إلى 1 ميكرو مول / لتر ليسوسنسور جرين DND-189 (مجسات جزيئية) (24). تم الحصول على صور متحد البؤر (Nikon Eclipse TE300 Nikon ، طوكيو ، اليابان) ، وتم قياس التألق المنبعث (Till Photonics ، Martinsried ، ألمانيا).

تم تعريض البلاعم الضامة لمدة 24 ساعة إلى 0 أو 10 ميكرومتر أميودارون ، قبل تحليل الكاتيبسين L في ليسات الخلية بواسطة النشاف الغربي (25).

أُصيبت الطبقات الأحادية لخلية فيرو في لوحات زراعة الأنسجة ذات 24 بئرًا ، والتي تمت معالجتها مسبقًا بـ 0 إلى 50 ميكرومتر من الأميودارون لمدة ساعتين ، بفيروس SARS-CoV في تعدد العدوى (moi) من 1 لمدة 1 ساعة عند 37 درجة مئوية. تم بعد ذلك غسل الخلايا باستخدام برنامج تلفزيوني واحتضانها طوال الليل في وجود الأميودارون. تمت معايرة الفيروس الذي تم إطلاقه في المادة الطافية على خلايا Vero و TCID50 محسوبة وفقًا لـ Spaerman-Kaerber.

عولجت خلايا فيرو لمدة ساعة عند 37 درجة مئوية مع متوسط ​​40 ملي مولار NH4Cl ، أو مع الأميودارون (10 أو 50 ميكرومتر). تمت إضافة SARS-CoV بعد ذلك لمدة ساعة عند 4 درجات مئوية (mo.i. 1). بعد إزالة اللقاح ، تم غسل الخلايا مرتين باستخدام MEM بدون FCS قبل معالجتها لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة باستخدام L-1-tosylamido-2-phenylethyl chloromethyl ketone-trypsin (10 ميكروغرام / مل سيغما). بعد تحضين خلايا إزالة التربسين طوال الليل في وسط النمو ، NH4تم تحديد التتر Cl ، أو الأميودارون ، والفيروسات في المادة الطافية (13-15).

البيانات تعني ± SEM أو تعني ± 95٪ فاصل الثقة (CI). تم تحليل الاختلافات مع الزوجين ر اختبار ، اختبار دونيت ، أو اختبار دن. ص & lt 0.05 اعتبرت كبيرة.

كان الأميودارون أكثر قابلية للذوبان في الماء من B2 ، خاصة عند درجة الحموضة الحمضية. في الواقع ، نظرًا لانخفاض الرقم الهيدروجيني من 7.4 إلى 5.0 ، زادت قابلية الذوبان في الماء للأميودارون من 0.069 ± 0.005 إلى 2.04 ± 0.11 ميكرومتر ، بينما زاد مستوى B2 من 0.009 ± 0.0001 إلى 0.10 ± 0.01 ميكرومتر (الاختلافات بين الأميودارون و B2 و بين الأس الهيدروجيني 5.0 و 7.4 كلها ذات دلالة إحصائية). تقارب الأميودارون للأغشية ، معبراً عنه بالسجلانا، أكبر بكثير من B2 عند الرقم الهيدروجيني 7.4 (على التوالي 4.23 ± 0.02 مقابل 3.20 ± 0.04) ، ولكنه أصغر من B2 عند الرقم الهيدروجيني 5.0 (3.63 ± 0.04 مقابل 4.57 ± 0.08).

أفاد بيرجستروم وزملاؤه مؤخرًا أن قابلية ذوبان الأميودارون في الماء تزداد بمقدار 5 أوامر من حيث الحجم حيث يتم تخفيض الرقم الهيدروجيني من 7.4 إلى 5.0 (18). سبب التناقض مع النتائج التي توصلنا إليها غير واضح. قد يرجع ذلك إلى حقيقة أننا بدأنا بـ 4 ميكرومتر من الأميودارون في الميثانول (أعلى تركيز ممكن) ، بينما بدأ بيرجستروم وزملاؤه بكمية زائدة من الدواء الصلب.

باستثناء الفحص المجهري متحد البؤر ، تم إجراء جميع الدراسات على الضامة السنخية البشرية المقدمة في هذا العمل سابقًا على الضامة السنخية للأرانب. لم نجد فرقًا بين الأنواع بالنظر إلى ما يلي: (1) 125 I-amiodarone امتصاص وتوزيع بين عضيات المادة الطافية اللاحقة للنووي (2) آثار الأميودارون على مورفولوجيا الخلية على مستوى EM (3) تأثير الأميودارون على امتصاص Lysosensor (4) تأثير الأميودارون على حيوية الخلية. وبالتالي نحن على يقين بشكل معقول من أن التأثيرات التي لوحظت على الضامة السنخية البشرية لم تكن مرتبطة بأصلها من رئة مقطوعة تشجر الأورام في أقسام مختلفة عن تلك التي خضعت لغسل القصبات الهوائية.

كما هو مبين في الشكل 1 أ ، يرتبط الأميودارون بسرعة بالضامة السنخية. كان الارتباط / الامتصاص خطيًا بمرور الوقت وكان يعتمد بشكل كبير على وجود مجموعة diethylamino-β-ethoxy ، منذ 125 I-B2 ، التي تفتقر إلى هذه المجموعة ، المرتبطة بالبلاعم 50 مرة أبطأ من الأميودارون (الشكل 1).

شكل 1. تجليد / امتصاص 125 من الأميودارون و 125 I-B2 بواسطة الضامة السنخية البشرية. (أ) تم تحضين الخلايا الملتصقة (10 6) بـ 0.2 ميكرومتر 125 I-amiodarone أو 125 I-B2 وتم قياس النشاط الإشعاعي المرتبط بالخلية في الأوقات المحددة. M ± SE ، ن = 4. يختلف عن B2: *ص & lt 0.03 **ص & لتر 0.01 (مزاوج ر اختبار). (ب) تأثير المثبطات على ارتباط / امتصاص الأميودارون بواسطة الضامة السنخية. تتعرض الخلايا لمدة 60 دقيقة لوسط عادي (عناصر تحكم) أو 2.5 ملي مولار من هيدروكلوريد أمانتادين (أمانت) ، 2.0 ميكرومتر من أكسيد فينيلارسين (فين) ، 1.5 ميكرومتر فليبين ، 10 ميكرومتر خلوي D (Cyt) ، 0.1 ميكرومتر وورتمانين (نبتة) ، 0.1 ميكرومتر بافيلوميسين أ1 (Bafilom) ، أو 0.1 ميكرومتر concanamycin A (Concan) ، تم تحضينها لمدة 60 دقيقة باستخدام 0.2 ميكرومتر 125 أنا-أميودارون قبل قياس النشاط الإشعاعي المرتبط بالخلايا (ن = 3-6). الامتصاص من خلايا التحكم = 100٪. * تختلف عن جميع الأنواع الأخرى باستثناء بافيلوميسين أو كونكاناميسين ، ص & lt 0.05 بواسطة ANOVA.

يمكن أن يتم تثبيط أو اضطراب الهيكل الخلوي دون تغيير في صافي امتصاص الأميودارون. في الواقع ، أكسيد فينيلارسين وأمانتادين (مثبطات الالتقام الخلوي بوساطة الكلاذرين) ، والفلبين (مثبط للالتقام الخلوي من خلال الكهوف) ، وخالاسين خلوي D (مفكك للهيكل الخلوي) ، وورتمانين (الذي يثبط الالتقام الطور السائل ، والبلعمة ، والحركة الموجهة من المواد من خلال مسار الالتقام) لم تؤثر على ارتباط 125 أنا-أميودارون مع الضامة (الشكل 1 ب). على الجانب الآخر ، فإن بافيلوميسين أ1 و concanamycin A ، الذي يبدد الحموضة الفراغية عن طريق تثبيط V-ATPase ، قلل من امتصاصه دون إلغائه (الشكل 1 ب). نظرًا لأن المثبطات المستخدمة ليس لها تأثير ضار على حيوية الخلية ، فإن هذه النتائج تشير إلى أنه لا توجد آلية تفضيلية لامتصاص الأميودارون وأن الأميودارون ، إلى جانب التراكم في عضيات حمضية ، يرتبط أيضًا بهياكل الخلايا الأخرى. في الواقع ، في سلسلة من التجارب التي قمنا فيها باحتضان الضامة بـ 125 I-amiodarone لمدة 0 ، 30 ، 60 ، و 120 دقيقة ثم أخضعنا المادة الطافية اللاحقة للنووية لسلسلة من عمليات الطرد المركزي التفاضلية التي تستغرق كل منها 10 دقائق (3000 ×) ز, 6,000 × ز, 10,000 × ز, 20,000 × ز, 100,000 × ز) ، الأميودارون المتراكم في جميع الكريات. ارتبط معظم النشاط الإشعاعي (أكثر من 85٪ من الإجمالي) بـ 3000 × ز, 6,000 × زو 10000 × ز الكريات ، في حين أن 100000 × ز احتوى الطاف في أي وقت على أقل من 2٪ من إجمالي النشاط الإشعاعي (غير موضح) ، مما يشير إلى أن اليود الحر يمثل جزءًا بسيطًا من إجمالي النشاط الإشعاعي.

لتوضيح مصير الأميودارون بعد الامتصاص ، قمنا باحتضان الضامة السنخية بـ 0.2 ميكرومتر 125 أنا-أميودارون ثم تابعنا توزيع النشاط الإشعاعي بين العضيات المعزولة من المادة الطافية النووية اللاحقة. في النظام الذي استخدمناه ، تهاجر الجسيمات الحالة نحو قاع الأنبوب ، وتبقى الجسيمات الداخلية المبكرة والمتأخرة في الثلث العلوي ، وتبقى شظايا من غشاء البلازما في الجزء العلوي وتتجمع الميتوكوندريا في أسفل التدرج ، كما يستنتج من التوزيع من علامات محددة: أريل سلفاتاز (ليسوسومات) ، راب 4 (جسيمات داخلية مبكرة) ، CD63 (جسيمات داخلية متأخرة) ، فاس (غشاء بلازما) (الشكل 2) (23). يتركز السيتوكروم سي أوكسيديز (علامة الميتوكوندريا) في الكسور من 1 إلى 4 ، بينما EEA1 (علامة أخرى على الإندوسومات المبكرة) لها نفس توزيع Rab4 (غير موضح).

الشكل 2. رابطة الأميودارون مع عضيات المادة الطافية التالية للنواة. تم تعريض الضامة السنخية البشرية الملتصقة (5 × 10 6 خلايا) إلى 0.2 ميكرومتر 125 أنا-أميودارون ± 0.5 ميكرومتر بافيلوميسين أ1 للأوقات المشار إليها. تم بعد ذلك تجزئة المادة الطافية اللاحقة للنواة بواسطة الطرد المركزي المتدرج الكثافة وتم حساب النشاط الإشعاعي على الكسور (أعلى) تم تحليل وجود Fas و Rab 4 و CD63 بواسطة النشاف الغربي (وسط) وتم قياس نشاط أريل سلفاتاز (قاع). الرقم يمثل ثلاث تجارب. الماس، 30 دقيقة مربعات، 60 دقيقة مثلثات، 120 دقيقة الدوائر، 120 دقيقة + بافيلوميسين.

كما هو مبين في الشكل 2 ، عندما تم تحضين البلاعم بـ 0.2 ميكرومتر 125 أنا-أميودارون ، تراكم النشاط الإشعاعي تدريجيًا في عضيات تهاجر في أقصى درجات التدرج ، وتجمع إلى حد أكبر نحو القاع. انخفض العلاج مع البافيلوميسين بشكل ملحوظ النشاط الإشعاعي المرتبط بكلتا مجموعتي العضيات (الشكل 2). وهكذا يبدو أن الأميودارون ، المقدم إلى الخلايا بتركيزات منخفضة ، يرتبط بطريقة تعتمد على الوقت مع عضيات متنوعة من طاف ما بعد النواة ، ويمكن التعرف على بعضها على أنها إندوسومات وليزوزومات على أساس قابلية الترسيب وتوزيع العلامات والحساسية للعلاج باستخدام بافيلوميسين A1.

تم الحصول على هذه النتائج من الضامة المحتضنة بـ 0.2 ميكرومتر من الأميودارون ، بينما يتعرض المرضى بشكل مزمن لتركيزات تتراوح من 1 إلى 4 ميكرومتر. لاختبار تأثير تركيزات أعلى من الأميودارون ، قمنا باحتضان الضامة السنخية لمدة 16 ساعة مع كل من 0.2 و 10.0 ميكرومتر 125 أنا-أميودارون ، ثم حللنا توزيع النشاط الإشعاعي بين عضيات المادة الطافية بعد النووية. كما هو مبين في الشكل 3 ، كان لتركيز الأميودارون تأثيرات ملحوظة على توزيع النشاط الإشعاعي. في الواقع ، عند وجوده بتركيز منخفض ، يتم توزيع الأميودارون في الغالب باتجاه قاع التدرج اللوني ، مما يشير إلى تراكم تفضيلي في الجسيمات الحالة. بتركيزات عالية ، يتراكم الأميودارون في الغالب نحو قمة التدرج ، مما يشير إلى تراكم تفضيلي في الإندوسومات.

الشكل 3. تأثير تراكيز الأميودارون المختلفة على توزيع الدواء بين عضيات المادة الطافية التالية للنواة. تم تحضين الضامة السنخية البشرية الملتصقة (5 × 10 6) مع 0.2 (الماس) أو 10.2 (مربعات) ميكرومتر 125 أنا-أميودارون لمدة 16 ساعة. تم بعد ذلك تجزئة المادة الطافية اللاحقة للنواة بواسطة الطرد المركزي المتدرج الكثافة كما ورد في الشكل 2 ، وتم تحليل توزيع النشاط الإشعاعي من خلال التدرج. M ± SE (ن = 3). تختلف عن السيطرة *ص & lt 0.02 (مزاوج ر اختبار).

تم تناول 125 I-B2 بواسطة الضامة السنخية إلى درجة منخفضة بحيث أن النشاط الإشعاعي للمادة الطافية اللاحقة للنووية كان بالكاد أكبر من الخلفية (غير معروض).

لتوصيف الحويصلات التي تتشكل عند التعرض للأميودارون ، قمنا بتحليل تأثيرات الدواء على توزيع العلامات المستخدمة بشكل شائع لتحديد الجسيمات الداخلية المبكرة والمتأخرة ، على التوالي EEA1 و CD63. كما هو مبين في الشكل 4 ، في خلايا التحكم ، قام EEA1 بتزيين مجموعة من العضيات المستديرة ، الموجودة بشكل أساسي في أحد طرفي الخلية ، بينما ارتبط CD63 بهياكل تظهر كنقاط نقطية وكشبكة ضعيفة منتشرة في جميع أنحاء السيتوبلازم ، وهو نمط متوافق مع التشكل الأنبوبي الحويصلي المعروف الذي تظهره الإندوسومات المتأخرة في البلاعم (26). كانت القليل من العضيات إيجابية لكل من العلامات (الشكل 4). لم يؤثر الأميودارون على توزيع EEA1 ، ولكنه غير توزيع CD63 بشكل كبير ، والذي كان يقع في الغالب عند حافة الفجوات الكبيرة الموضوعة في محيط الخلية (الشكل 4). كما هو الحال في خلايا التحكم ، كان عدد قليل جدًا من العضيات إيجابيًا لكلا الواسمتين. وبالتالي فإن الأميودارون لا يزعج مظهر وتوزيع الإندوسومات المبكرة ، ولكن له تأثيرات ملحوظة على تنظيم الإندوسومات المتأخرة.

الشكل 4. الفجوات التي يسببها الأميودارون تتضخم في وقت متأخر من الإندوسومات. تم تحضين البلاعم السنخية البشرية لمدة 16 ساعة مع وسط عادي (عناصر تحكم) أو مع 10 ميكرومتر من الأميودارون. تم بعد ذلك نفاذية الخلايا وتلطيخها عن طريق التألق المناعي غير المباشر باستخدام الأجسام المضادة المضادة لـ EEA1 كواسم داخلي مبكر والأجسام المضادة المضادة لـ CD63 كعلامة داخلية متأخرة. يتم عرض الصور البؤرية مع ظهور EEA1 لون أخضر و CD63 الظهور أحمر. تظهر الهياكل المتحدرة أصفر في الصورة المدمجة.

يغير الأميودارون بشكل كبير توزيع Lysosensor Green DND-189 ، وهي صبغة مسبب للحموضة تتراكم في عضيات حمضية نتيجة للبروتون وتتناسب شدة التألق مع الحموضة (24). في الواقع ، تراكمت الضامة الضامة للتحكم في Lysosensor على شكل حويصلات صغيرة متجمعة بالقرب من النواة وأظهرت أيضًا تلطيخًا منتشرًا للسيتوبلازم ، بينما عولجت البلاعم بـ 10 ميكرومتر من الأميودارون المتراكم Lysosensor في فجوات كبيرة تقع في الغالب في محيط الخلية (الشكل 5 أ). إلى جانب تغيير توزيع Lysosensor DND-189 ، انخفض الأميودارون الامتصاص الصافي للمسبار ، كما يتضح من انخفاض التألق المنبعث من الخلايا بأكملها (الشكل 5 ب). كان التأثير معتمدا على الجرعة وكان كبيرا عند 2 ميكرومتر أميودارون. يبدو أن انخفاض امتصاص Lysosensor في وجود الأميودارون يرجع إلى انخفاض الامتصاص بدلاً من زيادة إطلاق المسبار ، حيث فقدت الخلايا المحملة بـ Lysosensor ثم تعرضت للأميودارون تألقها بشكل أبطأ من الخلايا المحملة بـ Lysosensor ثم تعرضت بعد ذلك إلى متوسط ​​عادي (غير معروض).

الشكل 5. تأثير الأميودارون على امتصاص وتوزيع Lysosensor Green DND-189 بواسطة الضامة السنخية. تم تعريض الخلايا (10 6) المحتضنة لمدة 16 ساعة بمتوسط ​​(عناصر تحكم) أو أميودارون بالتركيزات المحددة لمدة 30 دقيقة إلى 1 ميكرولتر / لتر LysoSensor Green DND-189. بعد الغسيل ، تم الحصول على صور متحد البؤر (أ) وتم قياس التألق المنبعث من الخلايا الفردية عند 505 نانومتر استجابة لضوء الإثارة البالغ 440 نانومتر (ب). تمثل البيانات ثلاث تجارب مستقلة تم فيها قياس التألق المنبعث من 20 خلية. * يختلف عن السيطرة ، ص & lt 0.05 # يختلف عن التحكم و 2 ميكرومتر أميودارون ، ص & lt 0.01 بواسطة ANOVA.

كما هو مبين في الشكل 6 ، 10 ميكرومتر أميودارون ، لم يغير الكمية الإجمالية من كاتيبسين L الموجود في المحلولات التي تم الحصول عليها من الضامة السنخية ولم يؤثر على نضج هذا الإنزيم ، حيث أن النسبة بين البروكاتيبسين غير الناضج L (38 كيلو دالتون) ، ظل الشكل الوسيط 30 كيلو دالتون والكاثيبسين الناضج L (24 ، 25 كيلو دالتون) دون تغيير (25).

الشكل 6. لا يؤثر الأميودارون على محتوى الخلية الكلي أو نضوج الكاتيبسين L. حضنت الضامة السنخية (2 × 10 6 خلايا) لمدة 24 ساعة مع وسط (ضوابط) أو مع 10 ميكرومتر من أميودارون. تم بعد ذلك تجزئة محلول الخلية (20 ميكروغرام بروتين) بواسطة الرحلان الكهربائي للهلام بولي أكريلاميد ، ونقله على النيتروسليلوز ، وفحصه بمضاد للكاثيبسين L. يربط هي pro – cathepsin L (38 kD) ، وشكل وسيط (30 kD) و cathepsin L الناضج (نطاقان من 24 و 25 kD لم يتم حلهما وفقًا للشروط المستخدمة). ممثل أربع تجارب.

لقد ثبت سابقًا أن الأميودارون يمنع تحلل بروتين الفاعل بالسطح A ، مما يؤدي إلى تراكم البروتين غير المرقق في حجرة داخل الجسم (4). نظرًا لأن إصابة الخلايا المستهدفة بفيروس SARS-CoV تعتمد على الانقسام التحلل للبروتين S بواسطة بروتيناز الليزوزومات cysteine ​​proteinase cathepsin L (13 ، 14) ، فقد استكشفنا إمكانية تأثير الأميودارون على دورة حياة السارس. - فيروس كورونا. تم إجراء جميع الأعمال المتعلقة بفيروس SARS-CoV الحي في منشأة من المستوى الثالث للسلامة الأحيائية في لقاحات نوفارتيس ، سيينا ، إيطاليا. أظهرت التجارب الأولية أن الأميودارون تمتصه خلايا فيرو ، حيث كان الامتصاص مشابهًا لتلك الموجودة في الضامة السنخية بالنظر إلى حركية وحساسية المثبطات.

تم تحضين خلايا Vero لمدة ساعتين باستخدام 0 إلى 50 ميكرومتر من الأميودارون ثم أصيبت بعدوى SARS-CoV (mo.i. من 1). بعد ساعة واحدة من الإصابة ، تم غسل الخلايا واحتضانها في وسط النمو في وجود الدواء. في اليوم التالي ، تم حصاد المادة الطافية المستنبتة للخلية وتم تحديد كمية الفيروس بالمعايرة. كما هو مبين في الشكل 7 أ ، الذي يعرض نتائج أربع تجارب مستقلة ، أثر الأميودارون على دورة حياة فيروس السارس بطريقة تعتمد على التركيز: 5 ميكرومتر من الأميودارون تسبب في تناقص كبير في عيار الفيروس 10 ميكرومتر أدى الأميودارون إلى خفض عيار الفيروس جلب الأميودارون 10 مرات 50 ميكرومتر عيار الفيروس أقل من حد الكشف ، والذي كان 10 TCID50/ مل في هذا الاختبار.

الشكل 7. تأثير الأميودارون على عدوى السارس. (أ) تم تحضين خلايا فيرو لمدة ساعتين مع 0 إلى 50 ميكرومتر من الأميودارون ، وتعرضت لمدة ساعة واحدة لـ SARS-CoV (1 متر مكعب) وحضنت مرة أخرى مع الأميودارون لمدة 24 ساعة. تم تقييم تركيز الفيروس في المادة الطافية بالمعايرة في خلايا فيرو. خط منقط = الحد الأدنى من الاكتشاف. ممثل أربع تجارب. * يختلف بشكل كبير عن انخفاض تركيز الأميودارون (ص & lt 0.05). (ب) تأثير NH4Cl أو الأميودارون على عدوى فيروس كورونا سارس المعالج بالتريبسين. تم تحضين الخلايا عند 37 درجة مئوية لمدة ساعتين بمتوسط ​​(تحكم) ، 40 ملي مولار NH4Cl ، أو أميودارون (10 أو 50 ميكرومتر). بعد ذلك تم تحضين الخلايا لمدة ساعة عند 4 درجات مئوية باستخدام SARS-CoV (1 moi / خلية) ثم تم تحضين الفيروس المرتبط بالخلايا لمدة 5 دقائق عند 25 درجة مئوية مع أو بدون L-1-tosylamido-2-phenylethyl chloromethyl ketone -علاج التربسين. بعد ذلك تم تحضين الخلايا عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة باستخدام DMSO (عناصر تحكم) ، 40 ملي مولار NH4تم تحديد Cl ، أو الأميودارون (10 أو 50 ميكرومتر) ، والعيار الفيروسي في المادة الطافية. ممثل تجربتين. * تختلف اختلافًا كبيرًا عن الآخرين (ص & lt 0.05). في كلا اللوحتين ، تكون القيم تعني فاصل ثقة بنسبة 95٪ (سبيرمان-كاربر).

يمكن أن يكون الأميودارون سامًا للخلايا (4 ، 7) ويمكن أن يكون نشاطه المضاد للفيروسات بسبب انخفاض قابلية الخلية للحياة. لاستبعاد ذلك ، تم تحضين خلايا Vero لمدة 24 ساعة باستخدام 0 إلى 50 ميكرومتر من الأميودارون ، ثم تم تحليل قدرتها على دمج يوديد البروبيديوم باستخدام FACSCalibur (Becton Dickinson ، San Jose ، CA). وجدنا أن صلاحية الخلية كانت أكبر من 97٪ حتى 30 ميكرومتر أميودارون ، 91٪ عند 40 ميكرومتر أميودارون ، و 83٪ عند 50 ميكرومتر أميودارون. وبالتالي فإن الأميودارون له نشاط مضاد للفيروسات بتركيزات لا يؤثر فيها على الجدوى.

يمكن أن يكون التأثير المضاد للفيروسات للأميودارون ناتجًا عن التأثير المباشر للدواء على SARS-CoV. لتوضيح هذه النقطة ، تم تحضين SARS-CoV في وسط النمو عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة بدون أو مع 10 ميكرومتر من الأميودارون. قبل المعايرة على خلايا Vero ، تم تخفيف المضافين 10 مرات ، بحيث انخفض تركيز الأميودارون إلى 1 ميكرومتر (والذي ليس له أي تأثير على انتشار SARS-CoV). لم نجد فرقًا كبيرًا في عيار الفيروس بين الرواسب (البيانات غير معروضة). في تجربة أخرى ، تم حضانة SARS-CoV عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة باستخدام 5 أو 50 ميكرومتر من الأميودارون. ثم تم تخفيف خليط 50 ميكرومتر من فيروس الأميودارون مع وسط جديد إلى 5 ميكرومتر وتم معايرة كلا الخليطين على خلايا Vero. لم نجد فرقًا كبيرًا في عيار الفيروس بين الرواسب (البيانات غير معروضة). لذلك نستنتج أن التفاعل المباشر للأميودارون مع SARS-CoV غير محتمل أو غير مهم.

يدخل SARS-CoV إلى الخلايا المستهدفة عن طريق الارتباط من خلال بروتين S بمستقبلات السطح ACE2. ثم يتم تناول الفيروس ، وينتهي في حجرة داخلية حمضية حيث يؤدي البروتين S ، بعد التحلل البروتيني بواسطة كاثيبسين L ، إلى إطلاق الجينوم الفيروسي في السيتوبلازم. يبدو أن بيئة الأس الهيدروجيني الحمضية قليلاً في الجسيم الداخلي مهمة ، حيث يمكن منع العدوى بواسطة عوامل تحلل الجسم مثل NH4الكلور أو الكلوروكين (13). من حيث المبدأ ، يمكن للأميدارون أن يقلل من عدوى السارس - CoV عن طريق تقليل كثافة المستقبلات السطحية ، عن طريق التدخل في تحمض العضية أو بالتدخل في تخليق أو نضوج أو نشاط الكاثيبسين L. ومع ذلك ، فإن هذه الآليات غير محتملة. في الواقع ، لا يغير الأميودارون كثافة مستقبلات الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 على سطح الخلية ، كما هو محدد بواسطة قياس التدفق الخلوي باستخدام جسم مضاد أحادي النسيلة بشري ضد الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 (غير موضح) لا يمنع تحمض العضيات (المرجع 4 والشكل 5) ولا تتداخل مع تركيب ونضج الكاتيبسين L (الشكل 6).

في تجربة أخيرة ، اختبرنا ما إذا كان الأميودارون يتداخل مع المراحل المبكرة من دورة حياة الفيروس ، لا سيما تلك التي تنطوي على الجسيمات الداخلية ، حيث يبدو أن الدواء نشط. لقد استنتجنا أنه إذا كانت الإندوسومات هي الموقع الوحيد للتداخل بين الأميودارون ودورة حياة الفيروس ، فقد يكون من الممكن استعادة العدوى بالفيروس عن طريق علاج التربسين لـ SARS-CoV المرتبط بالخلايا المستهدفة (مما يمكّن الفيروس من الاندماج مباشرة مع الخلايا المستهدفة). غشاء البلازما وإصابة الخلايا دون استخدام المسار الداخلي). وفقًا لذلك ، تم تحضين خلايا Vero مسبقًا باستخدام الأميودارون ثم تم السماح للفيروس بالارتباط بالخلايا عند 4 درجات مئوية. بعد ذلك تمت إضافة التربسين للسماح بدمج الفيروس وأغشية الخلايا والإفراج المباشر عن جينوم الفيروس في العصارة الخلوية (15). بعد ذلك ، تم تحضين الخلايا في وسط النمو طوال الليل وتم تحديد عيار الفيروس. كما هو مبين في الشكل 7 ب ، يمكن أن يتغلب علاج التربسين للفيروس المرتبط بالخلايا على كتلة العدوى بوساطة كلوريد الأمونيوم ، وهو عنصر التحكم في هذه التجربة ، ولكن ليس الكتلة التي يسببها الأميودارون ، مما يشير بقوة إلى أن الأميودارون يتداخل مع دورة حياة السارس-CoV بعد توصيل الجينوم الفيروسي في العصارة الخلوية.

يتأثر ارتباط الأميودارون بالخلايا بشكل كبير بالمجموعة الجانبية ديثيلامينو- بيتا- إيثوكسي. في الواقع ، عند درجة الحموضة 7.4 ، كان للأميودارون قابلية ذوبان أكبر في الماء وتقارب أعلى للأغشية من B2 ، بينما في درجة الحموضة 5.0 كان للأميودارون قابلية ذوبان أكبر في الماء ولكن تقارب أقل للأغشية من B2 ، مما يشير إلى أن مجموعة ثنائي إيثيل أمين - بيتا - إيثوكسي قد تفضل كليهما نقل الدواء من البروتينات الحاملة إلى غشاء البلازما وتراكمه في عضيات حمضية. من الواضح ، مع ذلك ، أن الارتباط بالعضيات الحمضية هو مجرد إحدى الطرق التي يتراكم فيها الأميودارون داخل الخلايا ، حيث ينخفض ​​تبديد الحموضة الفراغية ولكنه لا يلغي الامتصاص.

من الدليل الحالي ، نقترح أن الأميودارون يمكن أن يرتبط بغشاء البلازما ثم يوزع على أجزاء مختلفة من الخلايا وفقًا لقسم غشاء البلازما الذي يحدث فيه. سوف يتبع الأميودارون المنتهي في الإندوسومات المبكرة مصير هذه العضيات على طول مسار الخلايا الداخلية ، ومع انخفاض درجة الحموضة اللمعية ، يمكن أن ينتقل من الغشاء المحدد إلى التجويف. يمكن أن يفسر هذا التفسير توزيع الدواء على جميع أغشية الخلايا ، وعدم وجود آلية تفضيلية للامتصاص ، والارتباط مع العضيات الحمضية ، وانخفاض الامتصاص بعد تبديد الحموضة الفراغية ، والارتباط التفضيلي مع الجسيمات الحالة (التي لديها أدنى مستوى. الرقم الهيدروجيني الداخلي).

المرضى الذين يعالجون بشكل مزمن بالأميودارون لديهم تركيزات في البلازما تتراوح من 1 إلى 4 ميكرومتر (1). حاولنا إعادة إنتاج هذه الحالة عن طريق تعريض البلاعم السنخية الحادة إلى 10 ميكرومتر من الأميودارون ، وهو علاج لا يؤثر على الجدوى ويحث على تكوين فجوات مماثلة لتلك التي نراها. في الجسم الحي (4 ، 7).نظهر الآن أن الفجوات تتضخم في وقت متأخر من الإندوسومات وأن الجسيمات الداخلية المبكرة تحافظ على تكوينها المعتاد ، بالاتفاق مع الأدلة السابقة التي تشير إلى أن الأميودارون يضطرب بشكل انتقائي الحيز المتأخر من بطريق الخلايا الداخلية (4 ، 7).

يعتمد التكوّن الحيوي والأداء السليم للمقصورات المتأخرة من مسار الالتقام على مجموعة من البروتينات المحفوظة للغاية (Hrs ، ESCRT I-III ، Alix) التي تتجمع على الجانب السيتوبلازمي من الإندوسومات المبكرة وتجعلها تنضج في أواخر الجسيمات الداخلية / الأجسام متعددة الحويصلات (27) ، 28). لقد وجد مؤخرًا أن قمع hVps ، الذي يحول فوسفاتيديلينوسيتول إلى فوسفاتيديلينوسيتول 3-فوسفات (موقع الالتحام لـ SCRTIII) ، يولد تغييرات مماثلة ، وإن لم تكن متطابقة ، لتلك التي يسببها الأميودارون (29). تشمل هذه التغييرات تجنيب الإندوسومات المبكرة ، وتشكيل الإندوسومات المتأخرة المتضخمة ، واضطراب تحلل البروتينات الليزوزومية الداخلية ، والاضطرابات الدقيقة في نضوج الكاتيبسين D (29). وبالتالي ، بالنظر إلى أن ESCRT III متورط في تكوين أجسام متعددة الخلايا (27 ، 28) ، فمن المغري التكهن بأن الأميودارون قد يعمل على هدف ذي صلة وأن الإندوسومات المتأخرة المتضخمة قد تنجم عن انخفاض تكوين الحويصلات داخل اللمعان.

وجدنا سابقًا أن احتضان الضامة السنخية مع 10.0 ميكرومتر أميودارون يقلل من حجم الحجرة الليزوزومية (4). قد يفسر هذا ملاحظة أنه عند تقديمه إلى الضامة بتركيز منخفض (0.2 ميكرومتر) ، يتم توزيع 125 أنا-أميودارون في الغالب على الجسيمات الحالة ، بينما عند تقديمها بتركيز أعلى (10.2 ميكرومتر) ، يتم توزيعها في الغالب على الإندوسومات.

يمكن أن يفسر تقلص الحجرة الليزوزومية أيضًا انخفاض امتصاص Lysosensor بواسطة الضامة المحتضنة مع الأميودارون.

تدخل العديد من الفيروسات المغلفة الخلايا المستهدفة عن طريق الالتقام الخلوي بوساطة مستقبلات وتصل مادتها الوراثية إلى السيتوبلازم بعد اندماج الأغشية الفيروسية والداخلية. تتطلب هذه العملية إعادة ترتيب بروتين سطح الفيروس والتعرض لمجال مسعور ، ببتيد الاندماج (30). بالنسبة للعديد من الفيروسات ، تتطلب إعادة الترتيب هذه فقط البيئة الحمضية المعتدلة لحيز داخل الجسم ، ولكن بعض الفيروسات ، مثل فيروس الإيبولا وفيروس السارس ، تحتاج أيضًا إلى نشاط البروتيز الداخلي (14 ، 31). في حالة فيروس SARS-CoV ، فإن البروتياز اللازم لغزو الخلية هو كاثيبسين البروتياز الداخلي L. لام (13).

تلعب الحجرات داخل الجسم وعملها السليم دورًا مهمًا في دورة حياة فيروس السارس ، لذلك ، اعتقدنا أن الأميودارون ، الذي يمنع التحلل المائي الداخلي الليزوزومي ويتداخل مع الأجزاء المتأخرة من المسار الداخلي ، يمكن أن يتداخل مع دخول الفيروس إلى الخلايا المستهدفة . وجدنا أن الأميودارون يثبط عدوى SARS-CoV ويبدو أن هذا التثبيط يحدث عند مستوى ما بعد الجسيم الداخلي ، لأن الأميودارون لا يؤثر على كثافة سطح ACE2 ، ولا يبدد الحموضة اللمعية ، ولا يضعف تخليق ونضج cathepsin L ، ولا يمكن استعداؤه من خلال علاج الفيروس المرتبط بالخلايا مع التربسين ، والذي يسمح بدخول الفيروس عبر غشاء البلازما.

كيف أن الأميودارون يثبط تضخيم SARS-CoV لا يزال غير واضح في الوقت الحالي ، ومع ذلك ، نظرًا لتأثيراته على مورفولوجيا الخلية (4 ، 7) ، فمن المغري التكهن بأنه قد يتداخل مع خطوات دورة حياة الفيروس التي تنطوي على أغشية الخلايا. على سبيل المثال ، يمكن أن يتداخل الأميودارون مع تجميع أو وظيفة المقصورات السيتوبلازمية الخاصة بالفيروس على شكل قارورة والتي يحدها غشاء مزدوج يتم فيه تصنيع الحمض النووي الريبي الفيروسي الجديد (32-34). بدلاً من ذلك ، قد يتداخل الأميودارون مع تجميع البروتينات الهيكلية والحمض النووي الريبي الجيني في فيريونات جديدة أو قد يمنع إطلاق فيروس النسل في الفضاء خارج الخلية ، نظرًا لأن مجمعات البروتين الضرورية للتكوين الحيوي للأجسام متعددة الخلايا (ESCRTs) تتوسط أيضًا في نمو الفيروس ( 27). علاوة على ذلك ، لا يزال من الممكن أن تحدث التأثيرات المضادة للفيروسات للأميودارون أيضًا في الإندوسومات.

من الواضح أن الدليل على وجود نشاط للأميودارون ضد فيروس السارس هو دليل أولي وإمكانية تطبيقه في العيادة مفتوحة للتساؤل ، نظرًا لأن التركيزات اللازمة للحصول على تأثير مضاد للفيروسات في المختبر أعلى من مستويات المصل الموجودة في المرضى الذين عولجوا من عدم انتظام ضربات القلب. ومع ذلك ، نشعر أن هذا الموضوع يستحق مزيدًا من التدقيق لعدة أسباب. السبب الأول هو ذلك في الجسم الحي يتم تحويل الأميودارون إلى نواتج أيضية ، والتي تحتفظ بالعديد من الأنشطة التي يعرضها الدواء الأم (7) ، وبالتالي فإن النشاط المضاد للفيروسات للأميودارون سيتم توضيحه كثيرًا من خلال اختبار في نموذج حيواني لمرض السارس ، على أمل أن الأميودارون ومستقلباته يمكن أن تتعاون ضد الفيروس. سبب آخر للدراسة في الجسم الحي ينبع النشاط المضاد للفيروسات للأميودارون من التغيرات في مدار الفيروس أثناء العدوى ، حيث تم اقتراح أنه في بداية الإصابة ، قد يدخل فيروس SARS-CoV الخلايا المستهدفة من خلال المسار الداخلي ، بينما في المراحل اللاحقة يمكن للالتهاب تحرير مجموعة متنوعة من البروتياز قد يؤدي إلى دخول الفيروس عبر غشاء البلازما ، مما يؤدي إلى زيادة أخرى في معدل النسخ المتماثل (15). نحن نفترض أن الأميودارون يمكن أن يخفف من آلية التضخيم هذه ، منذ ذلك الحين في المختبر يبدو أن نشاطه المضاد للفيروسات مستقل عن آلية دخول الفيروس إلى الخلايا المستهدفة. سبب آخر لإجراء دراسات الحماية على الحيوانات هو أنه يمكن تجربة الأميودارون بالاقتران مع الأدوية التي تؤثر على دورة حياة الفيروس من خلال آليات عمل مختلفة (16).

نستنتج أن الأميودارون يزعج الأجزاء المتأخرة من مسار الالتقام ويمنع عدوى فيروس كورونا السارس ، ويعمل بعد إيصال الجينوم الفيروسي إلى العصارة الخلوية.

يشكر المؤلفون الأستاذ فيديريكو ريا على مساعدته في عزل الضامة السنخية البشرية.


الوضع الحالي للأدوية المضادة للفيروسات والأهداف الدوائية لـ SARS CoV-2 وفيروسات كورونا الأخرى المسببة للأمراض البشرية

Coronaviridae هي عائلة فيروسية غريبة ، بجينوم RNA كبير جدًا ومظهر مميز ، تتمتع بميل ملحوظ للانتقال من الحيوانات إلى البشر. منذ بداية القرن الحادي والعشرين ، عبرت ثلاثة فيروسات كورونا شديدة العدوى ومسببة للأمراض حاجز الأنواع وتسببت في حدوث التهاب رئوي مميت ، وتسببت في تفشي فاشيات شديدة وتسببت في حالات طوارئ صحية بشرية ذات حجم لا يمكن تصوره. في الواقع ، في العقدين الماضيين ، ظهر نوعان من الفيروسات التاجية البشرية مما تسبب في مرض تنفسي خطير: فيروس كورونا المتلازمة التنفسية الحادة الوخيمة (SARS-CoV-1) وفيروس كورونا الشرق الأوسط التنفسي (MERS-CoV) ، مما تسبب في أكثر من 10000 حالة تراكمية مع الوفيات. معدلات 10٪ لـ SARS-CoV-1 و 34.4٪ لـ MERS-CoV. في الآونة الأخيرة ، ظهر فيروس فيروس كورونا المتلازمة التنفسية الحادة الوخيمة 2 (SARS-CoV-2) في الصين وتم تحديده كعامل مسبب لتفشي جائحة COVID-19 الأخير. لقد انتشر بسرعة في جميع أنحاء العالم ، مما تسبب في ما يقرب من 22 مليون حالة و 770،000 حالة وفاة في جميع أنحاء العالم ، مع معدل وفيات يقدر بنسبة 3.6 ٪ ، مما يشكل تحديات خطيرة للوقاية والعلاج المناسب والفعال. في الوقت الحالي ، باستثناء عقار ريمسيفير التماثلي للنيوكليوتيدات ، وعلى الرغم من الجهود العديدة ، لا يوجد علاج دوائي محدد ومثبت وقادر على إحداث الاحتواء الفيروسي بكفاءة وسرعة والتخلص من عدوى السارس- CoV-2 وكذلك عدم وجود علاج واسع النطاق. دواء طيفي لفيروسات كورونا الأخرى المسببة للأمراض البشرية. عامل محير آخر هو ندرة المعلومات الجزيئية المتعلقة بميل فيروسات كورونا لاكتساب مقاومة الأدوية ، وهي فجوة يجب سدها من أجل تحسين فعالية الأدوية المضادة للفيروسات.

في ضوء ذلك ، تقدم المراجعة الحالية تحديثًا منهجيًا للمعرفة الحالية بالجهود العالمية الملحوظة نحو تطوير استراتيجيات مضادة للفيروسات تهدف إلى التعامل مع العدوى التي يسببها SARS-CoV-2 وفيروسات كورونا الأخرى المسببة للأمراض البشرية ، والتي تعرض ملامح مقاومة الأدوية. تم تركيز الاهتمام على الأدوية المضادة للفيروسات التي تستهدف بشكل أساسي البروتياز الفيروسي ، وبوليميراز الحمض النووي الريبي ، والبروتين السكري ، والتي تم اختبارها في المختبر و / أو في التجارب السريرية وكذلك على المركبات الواعدة التي أثبتت فعاليتها ضد فيروسات كورونا بنسبة في السيليكو نهج إعادة توظيف الأدوية. في هذا الصدد ، تم الإبلاغ أيضًا عن رؤى جديدة حول المركبات ، والتي تم تحديدها من خلال الفحص الافتراضي القائم على الهيكل في قاعدة بيانات DrugBank التي تم توفيرها بواسطة ملف تعريف الاستهداف المتعدد. حددنا على وجه التحديد 14 مركبًا واعدًا يتميز بالسلعة في السيليكو تقارب ملزم تجاه ، على الأقل ، اثنين من الأهداف الأربعة المدروسة (البروتينات الفيروسية والمضيف). من بينها ، أظهر ceftolozane و NADH أفضل ملف تعريف متعدد الاستهداف ، وبالتالي يحتمل أن يقلل من ظهور سلالات فيروسية مقاومة. ركزنا أيضًا على الأهداف الدوائية الجديدة المحتملة لتطوير مركبات ذات نشاط مضاد لفيروس كورونا. من خلال تحليل مجموعة كبيرة من المتواليات الجينومية الفيروسية ، توفر المراجعة الحالية خريطة شاملة ومحددة للمناطق المحمية عبر بروتينات فيروس كورونا البشري الضرورية لتكاثر الفيروس ، وبالتالي مع عدم وجود ميل للتحور أو وجوده بشكل محدود للغاية. وبالتالي ، فإن هذه تمثل أهدافًا رئيسية قابلة للدواء لمركبات جديدة ضد عائلة الفيروس هذه. في هذا الصدد ، يعد تحديد الاستراتيجيات الدوائية الفعالة والمبتكرة أمرًا ذا أهمية قصوى لعلاج و / أو الوقاية من الجائحة الحالية ، ولكن من المحتمل أيضًا أن تفشي فيروسات كورونا المُمْرِضة للإنسان في المستقبل والتي لا مفر منها.


تساعد المطهرات في قتل فيروس كورونا و [مدش] ولكن من فضلك لا تشربها

آسف ، على ما يبدو كان هناك سوء تفاهم ثاني.
لم يقصد أن أقواله كانت مزحة.

كان يقصد أن يقول إنه كان مزحة.

كان الديمقراطيون متحمسين للغاية للتصويت لأول امرأة رئيسة في عام 2016 ، وما زالوا خاسرين (على الرغم من فوزهم بأغلبية الأصوات الشعبية).

كلا الحزبين كان لهما إقبال قياسي.

أعتقد أن جميع مؤيدي ترامب يجب أن يستمعوا ويفعلوا ما يقترحه رئيسهم.

ومع ذلك ، تبلغ نسبة الرفض لترامب حوالي 50٪ أسبوعًا بعد أسبوع.

يعتقد نصف الأمريكيين أن هذا لا بأس به.

ومع ذلك ، فإن نسبة الرفض لترامب تبلغ حوالي 50٪ أسبوعًا بعد أسبوع.

يعتقد نصف الأمريكيين أن هذا لا بأس به.

لا تضيعوا الوقت في التفكير أو الفهم. ركز فقط على انتخابات نوفمبر.

أصر على أنه ليس غبيًا ، لكنه مغرور جدًا ويجب عليه وضع طابعه على كل شيء يقوله أشياء عشوائية فقط للتأكد من أن صوته جزء منه.

الولايات المتحدة هي دولة حيث يتعين عليهم وضع صور توضيحية لرضع مختنقين ، وإلا فإن الآباء سوف يقاضون (مميتًا) بعد إعطائهم أطفالهم كلعب.

الولايات المتحدة هي دولة حيث يتعين عليهم وضع & quotslippery عندما يبتل & quot ؛ علامات الخروج عند مسح الأرض أو ستكون هناك دعاوى قضائية من الأشخاص المصابين الذين لم يتعلموا بطريقة ما أن السوائل تقلل من معامل الاحتكاك.

ومع ذلك ، هناك شيء ما يجبر الرئيس على التحدث بكلمات يمكن تفسيرها على أنها توحي بأن الناس يأكلون مواد كيميائية سامة. هو فقط لا يستطيع الاحتفاظ بالكلمات. يجب عليه إضافة شيء لربط نفسه بالأخبار القائلة بأن مادة التبييض تقتل الفيروسات. نظرًا لأن جميع الأشياء الحقيقية / المفيدة / التعليمية قد قيلت بالفعل من قبل الصادقين / المفيد / المستنير ، فإن كل ما يتركه هو. هراء.

ليس من المستغرب تمامًا ، هناك كلمة ألمانية لهذا: Geltungsdrang. الحاجة الى العد / جزء من المحادثة / الاعجاب.

لم يوضح الرئيس الخشبي للدولة أبدًا أنه بائع زيت ثعبان.

رأيت عنوانًا:
& quotDonn't Inject Disinfectants ، ليسول يحذر بينما ترامب يرفع فكرة & quot

لم تكن هذه محاكاة ساخرة. لم يكن هذا في The Onion.

ويبدو أنه سئم من دولة فاعلة أيضًا.

في عيونهم ، كان مكسورًا بالفعل ، لأنهم لم يكونوا في أعلى الكومة ..

إنهم يحتاجون فقط إلى مليون دولار يخدع براءة اختراع لقاح وسيكونون هناك مع إليسون وترامب وكل الآخرين ..

بكل جدية - لدي سؤال تقني / علمي حول هذا الموضوع. ونعم ، يرجى تحمل معي - أعرف القليل جدًا عن virii وعلم الأحياء بشكل عام (أكثر رجل أجهزة كمبيوتر).

في الظاهر ، يشير هذا إلى أنه عند 35 درجة مئوية / 80٪ رطوبة ، يموت الفيروس بسرعة مقارنة بـ 24 درجة مئوية / 20٪ رطوبة. ومع ذلك ، بسذاجة ، أتخيل أن الجزء الداخلي من الجسم يشبه إلى حد كبير 35 درجة مئوية (37.5 درجة مئوية؟) و 80 ٪ (100 ٪؟) رطوبة - فلماذا لا يموت الفيروس على الفور تقريبًا؟ هل تبدأ في التكاثر بسرعة؟ مثل في 5-10 دقائق؟ كنت دائمًا على الرغم من أن تكاثر الفيروس استغرق بضع ساعات حتى أبدأ حقًا ، لكن ربما أكون مخطئًا ..

& quot؛ من السخرية للتلاعب بوسائل الإعلام & quot

آمل أن يقرر ترامب حقن نفسه بكبسولة رصاص عالية السرعة.

آمل في الواقع أن يعيش في سن الشيخوخة. حُرم من فقاعته الصغيرة من الحماية النرجسية وأجبر على مواجهة ما هو فعلاً وما فعله ، وتسجيل التاريخ لهذه الأشياء لجميع الأجيال القادمة بالطبع.

الموت السريع النسيان هو أمر سهل للغاية بالنسبة لمخلوقات كهذه! *

* في العادة لا أدعو إلى معاقبة الأشياء غير القادرة معرفيًا على التعلم من العقوبة (هل ستجلد كلبًا لأنه لا يستطيع تعلم التحدث باللغة الإنجليزية؟) ، لكنني سأقوم باستثناء هنا ، كما قد يفعل درس الكائن ينفع الآخرين.

بكل جدية - لدي سؤال تقني / علمي حول هذا الموضوع. ونعم ، يرجى تحمل معي - أعرف القليل جدًا عن virii وعلم الأحياء بشكل عام (أكثر رجل أجهزة كمبيوتر).

في الظاهر ، يشير هذا إلى أنه عند 35 درجة مئوية / 80٪ رطوبة ، يموت الفيروس بسرعة مقارنة بـ 24 درجة مئوية / 20٪ رطوبة. ومع ذلك ، بسذاجة ، أتخيل أن الجزء الداخلي من الجسم يشبه إلى حد كبير 35 درجة مئوية (37.5 درجة مئوية؟) و 80 ٪ (100 ٪؟) رطوبة - فلماذا لا يموت الفيروس على الفور تقريبًا؟ هل تبدأ في التكاثر بسرعة؟ مثل في 5-10 دقائق؟ كنت دائمًا على الرغم من أن تكاثر الفيروس استغرق بضع ساعات حتى أبدأ حقًا ، لكن ربما أكون مخطئًا ..

أفترض أن درجة الحرارة ستكون للتدمير "في الهواء". ليس في محلول ملحي لطيف داخل جسم حي ، حيث من المفترض أن تكون درجات الحرارة والتأثيرات مختلفة بسبب البيئة المؤكسدة المختلفة.

(عفوًا! كلاً السيد ترامب يقترح على الناس حقن الهواء مباشرة في عروقهم!)

لست متأكدا من مدى دقة التحليل.

أعيش في سنغافورة ودرجة الحرارة المتأخرة تتراوح بين 30 و 35 درجة. الجو رطب للغاية هنا - على الأقل أعلى من 80 بالمائة في المتوسط.

على مدار الشهر الماضي ، شهدنا انفجارًا في الحالات بشكل رئيسي في مهاجع العمال الأجانب. يعمل هؤلاء العمال الأجانب بشكل أساسي في قطاع البناء أو يقومون بإخراج القمامة وما إلى ذلك تحت أشعة الشمس الحارقة. لا تحتوي المهاجع على تكييف وهي ساخنة جدًا كما هو متوقع.

مرحبًا ، انظر إلى ذلك ، كان هناك ارتفاع كبير في شعبية البحث عن & quot التعديل الخامس والعشرين & quot منذ الأول من مارس من هذا العام.

في غضون ذلك ، أقوم بوضع اللمسات الأخيرة على خططي لنصب دونالد جيه ترامب التذكاري. أعتقد أنه يمكننا وضع مبنى خارجي متهالك حول الجزء الخلفي من نصب لنكولن التذكاري في العاصمة ، مع ورق التواليت الخاص المطبوع بدستور الولايات المتحدة حتى تتمكن من مسح مؤخرتك به ، تمامًا مثل & quot The Donald & quot.

ابحث عن صفحة Go Fund Me التي ستفتح قريبًا.

يحاول معالجات fucktard الآن تدويرها لأن & quothe كان يسخر! & quot.

لا ، لقد كان يقوم بضربه المعتاد ، ويملأ الهواء بإفرازاته السمعية دون أي اهتمام بما يخرج من فمه بالفعل. كل ما كان يفعله هو محاولة الظهور كما لو كان يقود مرؤوسيه إلى Get Stuff Done ، لأن هذه هي الحيلة الوحيدة التي يمتلكها إلى جانب الكذب.

& quothe كان ساخرًا! & quot ، يتم استخدام التدوير عندما لا يكون لديهم شيء أفضل للاستخدام.

هل استخدموا ذلك من قبل؟ عادة ما يضاعفون من الأكاذيب الغبية و / أو مجرد كذبة صريحة حول & quot؛ أخبار مزيفة & quot.

بكل جدية - لدي سؤال تقني / علمي حول هذا الموضوع. ونعم ، يرجى تحمل معي - أعرف القليل جدًا عن virii وعلم الأحياء بشكل عام (أكثر رجل أجهزة كمبيوتر).

في الظاهر ، يشير هذا إلى أنه عند 35 درجة مئوية / 80٪ رطوبة ، يموت الفيروس بسرعة مقارنة بـ 24 درجة مئوية / 20٪ رطوبة. ومع ذلك ، بسذاجة ، أتخيل أن الجزء الداخلي من الجسم يشبه إلى حد كبير 35 درجة مئوية (37.5 درجة مئوية؟) و 80 ٪ (100 ٪؟) رطوبة - فلماذا لا يموت الفيروس على الفور تقريبًا؟ هل تبدأ في التكاثر بسرعة؟ مثل في 5-10 دقائق؟ كنت دائمًا على الرغم من أن تكاثر الفيروس استغرق بضع ساعات حتى أبدأ حقًا ، لكن ربما أكون مخطئًا ..

كان الديمقراطيون متحمسين للغاية للتصويت لأول امرأة رئيسة في عام 2016 ، وما زالوا خاسرين (على الرغم من فوزهم بأغلبية الأصوات الشعبية).

كلا الحزبين كان لهما إقبال قياسي.

تمامًا كما لمعلوماتك ، وفقًا لويكيبيديا
https://en.wikipedia.org/wiki/Voter_tur. _انتخابات
عام 2016 كان لديه إقبال قياسي بالأرقام المطلقة فقط. كنسبة مئوية من السكان في سن الاقتراع ، كان عام 2016 في الجانب المرتفع (المنخفض بشكل محبط) من الأرقام في نصف القرن الماضي عند 55.7٪. لكن لم يكن هناك مكان بالقرب من السجل. 2008 كان 58.2٪ (أيضا لم يسجل) و 2012 كان قريبا 54.9٪.

وفقط لأنني كنت فضوليًا. لديها معلومات فقط منذ عام 1828 ، ولكن أعلى مستوى كان 1876 عند 81.8٪. لم نكسر 70٪ منذ أكثر من قرن.

قد يطلب من الناس شرب فافور إيد مع السيانيد.

كان الديمقراطيون متحمسين للغاية للتصويت لأول امرأة رئيسة في عام 2016 ، وما زالوا خسروا (على الرغم من فوزهم بأغلبية الأصوات الشعبية).

كلا الحزبين كان لهما إقبال قياسي.

تمامًا كما لمعلوماتك ، وفقًا لويكيبيديا
https://en.wikipedia.org/wiki/Voter_tur. _انتخابات
عام 2016 كان لديه إقبال قياسي بالأرقام المطلقة فقط. كنسبة مئوية من السكان في سن الاقتراع ، كان عام 2016 في الجانب المرتفع (المنخفض بشكل محبط) للأرقام في نصف القرن الماضي عند 55.7٪. لكن لم يكن هناك مكان بالقرب من السجل. 2008 كان 58.2٪ (أيضا لم يسجل) و 2012 كان قريبا 54.9٪.

وفقط لأنني كنت فضوليًا. لديها معلومات فقط منذ عام 1828 ، ولكن أعلى مستوى كان 1876 عند 81.8٪. لم نكسر 70٪ منذ أكثر من قرن.

لا أعتقد أن أي شخص يدرك مدى السوء الذي يمكن أن تكون عليه الأمور. التقاط القطع سيكون صعبًا.

بكل جدية - لدي سؤال تقني / علمي حول هذا الموضوع. ونعم ، يرجى تحمل معي - أعرف القليل جدًا عن virii وعلم الأحياء بشكل عام (أكثر رجل أجهزة كمبيوتر).

في الظاهر ، يشير هذا إلى أنه عند 35 درجة مئوية / 80٪ رطوبة ، يموت الفيروس بسرعة مقارنة بـ 24 درجة مئوية / 20٪ رطوبة. ومع ذلك ، بسذاجة ، أتخيل أن الجزء الداخلي من الجسم يشبه إلى حد كبير 35 درجة مئوية (37.5 درجة مئوية؟) و 80 ٪ (100 ٪؟) رطوبة - فلماذا لا يموت الفيروس على الفور تقريبًا؟ هل تبدأ في التكاثر بسرعة؟ مثل في 5-10 دقائق؟ كنت دائمًا على الرغم من أن تكاثر الفيروس استغرق بضع ساعات حتى أبدأ حقًا ، لكن ربما أكون مخطئًا ..

أنفك هو المكان الذي يتم فيه تسخين الهواء قبل أن يدخل إلى رئتيك. يمكن أن يكون أكثر برودة عند نقاط الدخول (الأنف والعينين) منه داخل جسمك.

كان الديمقراطيون متحمسين للغاية للتصويت لأول امرأة رئيسة في عام 2016 ، وما زالوا خسروا (على الرغم من فوزهم بأغلبية الأصوات الشعبية).

كلا الحزبين كان لهما إقبال قياسي.

تمامًا كما لمعلوماتك ، وفقًا لويكيبيديا
https://en.wikipedia.org/wiki/Voter_tur. _انتخابات
عام 2016 كان لديه إقبال قياسي بالأرقام المطلقة فقط. كنسبة مئوية من السكان في سن الاقتراع ، كان عام 2016 في الجانب المرتفع (المنخفض بشكل محبط) للأرقام في نصف القرن الماضي عند 55.7٪. لكن لم يكن هناك مكان بالقرب من السجل. 2008 كان 58.2٪ (أيضا لم يسجل) و 2012 كان قريبا 54.9٪.

وفقط لأنني كنت فضوليًا. لديها معلومات فقط منذ عام 1828 ، ولكن أعلى مستوى كان 1876 عند 81.8٪. لم نكسر 70٪ منذ أكثر من قرن.

لا أعتقد أن أي شخص يدرك مدى السوء الذي يمكن أن تكون عليه الأمور. التقاط القطع سيكون صعبًا.

أعتقد أن هذا ما قاله المصريون واليونانيون والرومان والإسبان أيضًا.

إذا سألتني ، يبدو أن ترامب يحاول قتل ناخبيه.

كلما فكرت في هذا الأمر ، بدا الأمر أكثر جنونًا.

هذا ليس مثل بوش الثاني ، حيث وصفه كثير من الناس بأنه أحمق. ما زلت متأكدًا من أنه ربما يكون رجلًا ذكيًا بشكل معقول ، مجرد متحدث غبي فعل بعض الأشياء التي كانت إلى حد ما أقل من ذكي.

أعتقد أن ترامب قد يكون * في الواقع * أقل من مستوى الذكاء. أنا متأكد من أن معظم الأشخاص الذين لا يشاركون عاطفيًا في العالم السياسي يعرفون أن الرجل ليس ألمع ليزر في عرض الضوء ، وكان هذا واضحًا لفترة طويلة. أنا لا أقول أنه يعاني من إعاقة عقلية عميقة أو أنه مثل ثلاثة سيجما على اليسار على منحنى الجرس ، ولكن ... واو. أنا فقط في حيرة من الكلمات.

بالحديث عن جورج دبليو بوش ، شاهدت العام الماضي مقابلة معه يتحدث عن هوايته في الرسم ، وقد أدهشتني كم كان أكثر بلاغة مما أتذكره. كان رائع.

بالتفكير في ذلك ، لا أعتقد أنه تحسن بالفعل في التحدث ، ولكن بالمقارنة مع رئيسنا الحالي ، فقد يكون شكسبير أيضًا.

بالنسبة لي ، كان الشيء المتعلق بـ W هو أنه بينما كنت أختلف مع كل ما قاله الرجل أو فعله ، كنت أعتقد أنه يؤمن بحقيقة ما كان يقوله ، وكان يفعل ما شعر أنه الأفضل للبلد. لقد اختلفنا ببساطة حول التفسيرات وما يجب فعله ردًا على ذلك. أعتقد أنه كان رجلاً حقيقياً للغاية. وأعتقد أن والده كان كذلك.

كان دونالد ترامب وسيظل دائمًا رجلًا محتالًا وأكثر ذكاءً. هو فقط في هذا لنفسه ولعائلته.

وبعد أن مررت بفقدان العديد من الأقارب المقربين بسبب الخرف ، أعتقد حقًا أنه يظهر أيضًا العلامات المبكرة لذلك. بعض الأشياء التي يقوم بها مطابقة لما فعلته جدتي وجدتي مع تقدم ظروفهما.

أنا غريب بعض الشيء من النغمة التي تكاد تكون اعتذارية في هذه المقالة.

كان اقتراحه الأول هو أننا & نخرج الجسد & quot؛ بشيء هائل- يميل ترامب إلى مواجهة مشاكل في إنهاء قطار فكري} سواء كانت الأشعة فوق البنفسجية أو مجرد ضوء قوي للغاية. ينتقل إلى هذه الفكرة من المعلومات التي تفيد بأن ضوء الشمس على الأسطح الخارجية يحط من Cov2 بسرعة. من الواضح أن الضوء لا يمكن أن يدخل جسمك ، لذا فهو يرفع الرهان من خلال اقتراح أنه يمكننا الحصول على الضوء في شخص ما وهو ما يمكنك القيام به إما من خلال الجلد أو بطريقة أخرى & quot. & quot بطريقة أخرى & quot؛ تعني إلى حد كبير إدخال ضوء مرئي ساطع أو ضوء UV أسوأ داخل شخص ما.

ثم يقول & quot؛ ثم أرى المطهر ، حيث يزيله في غضون دقيقة. دقيقة واحدة. وهل هناك طريقة يمكننا من خلالها القيام بشيء من هذا القبيل ، عن طريق الحقن بالداخل أو للتنظيف تقريبًا. & quot والسلسلة هنا & quot؛ مطهر & quot & مثل الحقن & quot & quot & quotalmost & quot؛ للتنظيف & quot (تستخدم مطهرات التجزئة عادةً).

يمكنك أن تجادل بأن & quotdo شيء من هذا القبيل & quot ؛ يشير إلى أنه لم يكن يفكر على وجه التحديد في حقن المطهر في شخص ما - ولكن تقريبًا أي شيء يمكن اعتباره مطهرًا سيكون بنفس الخطورة. ومثل ترقيته الغريبة لأشخاص الكلوروكين ، سوف يقفزون فوق هذا الجزء ويقرؤونه كما يعتقد ترامب أن الصياغة الرئيسية لليسول ستعالج covid19! & quot

لم تكن لحظة & quot؛ ترامب يفكر بصوت عال & quot .. لقد كانت لحظة أخرى من ترامب يقول فقط ما برز في رأسه دون تفكير على الإطلاق.

بكل جدية - لدي سؤال تقني / علمي حول هذا الموضوع. ونعم ، يرجى تحمل معي - أعرف القليل جدًا عن virii وعلم الأحياء بشكل عام (أكثر رجل أجهزة كمبيوتر).

في الظاهر ، يشير هذا إلى أنه عند 35 درجة مئوية / 80٪ رطوبة ، يموت الفيروس بسرعة مقارنة بـ 24 درجة مئوية / 20٪ رطوبة. ومع ذلك ، بسذاجة ، أتخيل أن الجزء الداخلي من الجسم يشبه إلى حد كبير 35 درجة مئوية (37.5 درجة مئوية؟) و 80 ٪ (100 ٪؟) رطوبة - فلماذا لا يموت الفيروس على الفور تقريبًا؟ هل تبدأ في التكاثر بسرعة؟ مثل في 5-10 دقائق؟ كنت دائمًا على الرغم من أن تكاثر الفيروس استغرق بضع ساعات حتى أبدأ حقًا ، لكن ربما أكون مخطئًا ..

أنفك هو المكان الذي يتم فيه تسخين الهواء قبل أن يدخل إلى رئتيك. يمكن أن يكون أكثر برودة عند نقاط الدخول (الأنف والعينين) منه داخل جسمك.

كما أنه لا يعادل ذلك حتى مع 80٪ رطوبة و 35 درجة مئوية - وهذا على سطح غير بيولوجي. بمجرد وصول الفيروس إلى مجرى الهواء لديك ، يكون لديه وقت للتلامس مع بطانة الممرات الأنفية والحلق والمسالك الهوائية والحصول على حقنة في إصابة الخلية.

حدد الوقت المستغرق لأخذ نفس عميق بشكل معتدل - أقل من ثانية. في تلك الثانية يمكن أن ينتقل إلى أسفل رئتيك. وهو ليس فيروسًا واحدًا ، سيكون سحابة منهم.

السبب في أن SC2 معدي للغاية هو أن البروتينات الموجودة على "التاج" جيدة بشكل استثنائي في الالتصاق بمستقبلات ACE3 في تلك الخلايا ، لذلك لا يتطلب الأمر سوى القليل لبدء العدوى.

واحد يحدث ، كل هذا يحدث داخل خلايا بطانة الرئة حيث لن تحدث الأضواء الساطعة أو المطهرات أو درجات الحرارة العالية أو الرطوبة أي فرق. بمجرد أن تنفجر من خلية واحدة ، سيكون هناك عشرات الآلاف من الأشخاص الذين يصابون بالخلايا من حولهم أو يتم إجراؤهم بسرعة في حالة السعال.

أود حقًا أن أرى دردشة Slack لـ Ars Orbiting HQ في الفترة التي تسبق هذا المقال. حقا.

يجب على جميع المنافذ الإخبارية بشكل جماعي التوقف عن الإبلاغ عما يقوله * دونالد ترامب * والإبلاغ فقط عما * يفعله بالفعل * ، لأن كل مقالة إخبارية تدور دائمًا حول مدى غباء تعليقاته بشكل صادم على * كل شيء * ، لذلك يقوم الناس بضبطها.

إذا فعل دونالد ترامب شيئًا فظيعًا حقًا ، فإنه يضيع وسط الضوضاء البيضاء لتعليقاته الغبية ، أو يُنسى في اليوم التالي عندما يقول شيئًا آخر صادمًا.

هذه المقالة هي مثال ممتاز - كم عدد الأشخاص الذين كانوا سيفكرون بجدية في حقن أنفسهم بمطهر إذا لم يكن أحد يعلم أن ترامب قد ذكر ذلك على الإطلاق؟

يبدو الأمر كما لو أنه يعرف كيف ستبلغ وسائل الإعلام عنه وتتصرف وفقًا لذلك لخلق أقصى قدر من الفوضى.

لقد فعل شيئًا فظيعًا حقًا من خلال اقتراحه على الناس بحقن المطهرات كعلاج لـ COVID-19.

كان الديمقراطيون متحمسين للغاية للتصويت لأول امرأة رئيسة في عام 2016 ، وما زالوا خسروا (على الرغم من فوزهم بأغلبية الأصوات الشعبية).

كلا الحزبين كان لهما إقبال قياسي.

تمامًا كما لمعلوماتك ، وفقًا لويكيبيديا
https://en.wikipedia.org/wiki/Voter_tur. _انتخابات
عام 2016 كان لديه إقبال قياسي بالأرقام المطلقة فقط. كنسبة مئوية من السكان في سن الاقتراع ، كان عام 2016 في الجانب المرتفع (المنخفض بشكل محبط) للأرقام في نصف القرن الماضي عند 55.7٪. لكن لم يكن هناك مكان بالقرب من السجل. 2008 كان 58.2٪ (أيضا لم يسجل) و 2012 كان قريبا 54.9٪.

وفقط لأنني كنت فضوليًا. لديها معلومات فقط منذ عام 1828 ، ولكن أعلى مستوى كان 1876 عند 81.8٪. لم نكسر 70٪ منذ أكثر من قرن.

لا أعتقد أن أي شخص يدرك مدى السوء الذي يمكن أن تكون عليه الأمور. التقاط القطع سيكون صعبًا.

أعتقد أن هذا ما قاله المصريون واليونانيون والرومان والإسبان أيضًا.

أنا لا أتحدث عن هذا الوباء فقط.

بكل جدية - لدي سؤال تقني / علمي حول هذا الموضوع. ونعم ، يرجى تحمل معي - أعرف القليل جدًا عن virii وعلم الأحياء بشكل عام (أكثر رجل أجهزة كمبيوتر).

في الظاهر ، يشير هذا إلى أنه عند 35 درجة مئوية / 80٪ رطوبة ، يموت الفيروس بسرعة مقارنة بـ 24 درجة مئوية / 20٪ رطوبة. ومع ذلك ، بسذاجة ، أتخيل أن الجزء الداخلي من الجسم يشبه إلى حد كبير 35 درجة مئوية (37.5 درجة مئوية؟) و 80 ٪ (100 ٪؟) رطوبة - فلماذا لا يموت الفيروس على الفور تقريبًا؟ هل تبدأ في التكاثر بسرعة؟ مثل في 5-10 دقائق؟ كنت دائمًا على الرغم من أن تكاثر الفيروس استغرق بضع ساعات حتى أبدأ حقًا ، لكن ربما أكون مخطئًا ..

أنفك هو المكان الذي يتم فيه تسخين الهواء قبل أن يدخل إلى رئتيك. يمكن أن يكون أكثر برودة عند نقاط الدخول (الأنف والعينين) منه داخل جسمك.

كما أنه لا يعادل ذلك حتى مع 80٪ رطوبة و 35 درجة مئوية - وهذا على سطح غير بيولوجي. بمجرد وصول الفيروس إلى مجرى الهواء لديك ، يكون لديه وقت للتلامس مع بطانة الممرات الأنفية والحلق والمسالك الهوائية والحصول على حقنة في إصابة الخلية.

حدد الوقت المستغرق لأخذ نفس عميق بشكل معتدل - أقل من ثانية. في تلك الثانية يمكن أن ينتقل إلى أسفل رئتيك. وهو ليس فيروسًا واحدًا ، سيكون سحابة منهم.

السبب في أن SC2 معدي للغاية هو أن البروتينات الموجودة على "التاج" جيدة بشكل استثنائي في الالتصاق بمستقبلات ACE3 في تلك الخلايا ، لذلك لا يتطلب الأمر سوى القليل لبدء العدوى.

واحد يحدث ، كل هذا يحدث داخل خلايا بطانة رئتيك حيث لن تحدث الأضواء الساطعة أو المطهرات أو درجات الحرارة العالية أو الرطوبة أي فرق. بمجرد أن تنفجر من خلية واحدة ، سيكون هناك عشرات الآلاف من الأشخاص الذين يصابون بالخلايا من حولهم أو يتم إجراؤهم بسرعة في حالة السعال.

بكل جدية - لدي سؤال تقني / علمي حول هذا الموضوع. ونعم ، يرجى تحمل معي - أعرف القليل جدًا عن virii وعلم الأحياء بشكل عام (أكثر رجل أجهزة كمبيوتر).

في الظاهر ، يشير هذا إلى أنه عند 35 درجة مئوية / 80٪ رطوبة ، يموت الفيروس بسرعة مقارنة بـ 24 درجة مئوية / 20٪ رطوبة. ومع ذلك ، بسذاجة ، أتخيل أن الجزء الداخلي من الجسم يشبه إلى حد كبير 35 درجة مئوية (37.5 درجة مئوية؟) و 80 ٪ (100 ٪؟) رطوبة - فلماذا لا يموت الفيروس على الفور تقريبًا؟ هل تبدأ في التكاثر بسرعة؟ مثل في 5-10 دقائق؟ كنت دائمًا على الرغم من أن تكاثر الفيروس استغرق بضع ساعات حتى أبدأ حقًا ، لكن ربما أكون مخطئًا ..

أنفك هو المكان الذي يتم فيه تسخين الهواء قبل أن يدخل إلى رئتيك. يمكن أن يكون أكثر برودة عند نقاط الدخول (الأنف والعينين) منه داخل جسمك.

كما أنه لا يعادل ذلك حتى مع 80٪ رطوبة و 35 درجة مئوية - وهذا على سطح غير بيولوجي. بمجرد وصول الفيروس إلى مجرى الهواء لديك ، يكون لديه وقت للتلامس مع بطانة الممرات الأنفية والحلق والمسالك الهوائية والحصول على حقنة في إصابة الخلية.

حدد الوقت المستغرق لأخذ نفس عميق بشكل معتدل - أقل من ثانية. في تلك الثانية يمكن أن ينتقل إلى أسفل رئتيك. وهو ليس فيروسًا واحدًا ، سيكون سحابة منهم.

السبب في كون SC2 معديًا جدًا هو أن البروتينات الموجودة على "التاج" جيدة بشكل استثنائي في الالتصاق بمستقبلات ACE3 في تلك الخلايا ، لذلك لا يتطلب الأمر سوى القليل لبدء العدوى.

واحد يحدث ، كل هذا يحدث داخل خلايا بطانة الرئة حيث لن تحدث الأضواء الساطعة أو المطهرات أو درجات الحرارة العالية أو الرطوبة أي فرق. بمجرد أن تنفجر من خلية واحدة ، سيكون هناك عشرات الآلاف من الأشخاص الذين يصابون بالخلايا من حولهم أو يتم إجراؤهم بسرعة في حالة السعال.

أحد الأشياء المثيرة للاهتمام حول هذا الإنزيم هو أنه ليس موجودًا كثيرًا على سطح خلايا الحويصلات الرئوية ، على الأقل عند مقارنته ببعض الأعضاء الداخلية. وهذا يعني أن الفيروس يمكن أن يصيب تلك الخلايا عند استرخاء ، ويطلق نسلها في الزفير ، دون إعاقة خطيرة لعمل الرئتين. فقط عندما يتحرك الهجوم إلى الداخل إلى مناطق التكاثر الأكثر إسرافًا ، تبدأ عاصفة السيتوكين بشكل جدي.


شاهد الفيديو: aCE2 (يونيو 2022).


تعليقات:

  1. Grozragore

    برافو ، ما الكلمات ... فكرة عظيمة

  2. Wolfrik

    عوض!

  3. Broden

    كيف سيؤمر أن يفهم؟

  4. Dougal

    هي فكرة ممتازة

  5. Gabi

    هذه الفكرة عفا عليها الزمن

  6. Houdenc

    موافق ، رسالة جيدة للغاية



اكتب رسالة